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请问各位网友,我提的细胞膜蛋白,已经冻干了,打算做WESTERN,用什么来溶解才能保证蛋白不降解呀?[/color][/size],[size=2][color=Black]
很简单,用1
2014年02月05日发布人:idoww
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都不没有。当然可能其他方面都可能存在问题:1.目的蛋白的上样量如何?(磷酸化蛋白容易脱磷酸化,所以提取蛋白时很重要,而且本身磷酸化蛋白的丰度就低);2抗体的浓度可能要高;3显色可能要敏感;4洗膜时间要短点,次数少点,且摇的力度要小点
2014年05月12日发布人:wanglaoshi
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这是我第一次用Ni柱纯化的蛋白SDS-PAGE结果:左侧是分子量标记,右侧最亮的条带是目的蛋白,但是还有不少的杂蛋白污染。不知这样的结果怎么样?是不是分离纯度太低,需要改进?我分离蛋白采用的是
2013年05月13日发布人:如影随形
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[size=2][color=Black]大家可以自己尝试,8M的尿素你扔到-18度的冰箱里面看看会有什么结果就行了。[/color][/size],[size=2][color=Black]低温,安静,平滑的变性盐下降,加上电场约束,复性还需要什么?希望大家提供宝贵意见,进一步改进这台仪器
2013年11月27日发布人:zsxan1990
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29与30相差好像不大吧,这说明你的理论分子量还是可靠的。用SDS-PAGE得出的分子量与理论值相差1,是很正常的。如果你想确切知道目的蛋白的分子量,可以做个质谱,或者是氮端测序。至于道尔顿与 mol之间的换算关系,你可以看一看高中的化学课本即可![/color][/size],[size=2][color=Black]
2013年07月06日发布人:锤子
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当滴定临近终点时,一慢都是减慢滴点速度,是否有朋友按1/2、1/4滴进行滴定的?甚至听说有1/8滴,不知道怎么控制的,欢迎大家就自己所知道的参与讨论。,按1/2、1/4滴进行滴定是可以的,1/8滴?不现实!,看显色剂的颜色而定!,肯定
2010年11月21日发布人:jeirf3uwd
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最近在做重组蛋白表达,表达之后也有目的条带,但是就是分子量比理论值要偏大。我的质粒是经过测序的,没有碱基的缺失和突变。另外,我做的是SDS-PAGE.偏大5-50都不等,各位大师帮帮忙,解决下... 着急啊!!!,SDS-PAGE确定的
2016年03月21日发布人:huali
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要用分泌型蛋白做Western blot,想加药物刺激后分别从细胞的和细胞上清液中提取蛋白。但不知道细胞上清液提取蛋白的具体方法,好像还需要浓缩。谁做过的,可不可以分享下经验。最好有具体的
2013年04月11日发布人:dhpbj
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可抑制半胱氨酸蛋白酶和乙酰胆碱酯酶。有效浓度为0.1-1mM。难溶于水,且在水溶液中非常不稳定;
LEUPEPTINE
Inhibition spectrum: inhibits serine (trypsin (Ki=13 µM
2013年10月09日发布人:嗅嗅
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转载
工程设计中使用气动调节阀,需表明调节阀的FO、FC、FL,这三个符合我意思我明白,可是不知道该怎么样选?是不是如果阀门带定位器,那就是FL,如果是气动活塞式执行机构就是FC或FO?
还有如果选的是双作用执行机构,是不是就表示阀门
2013年08月21日发布人:疲惫黑眼圈