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[size=2][font=黑体]最近要开始试验了,从没养过细胞,这次要用HEK293,没有找到相关的文献,有没有前辈能够指导一二,或者给我点相关的文献啊?非常感谢了。[/font][/size],[size=2]
我们这养过 还算好养
2015年02月23日发布人:october7
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载体是pGEX
蛋白结构是GST-target protein-6His
纯化是用Ni-IDA纯化包涵体蛋白
电泳是SDS-PAGE变性电泳
不同的目的蛋白,表达均有图上那条比主
2013年11月09日发布人:purrr
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[size=2][color=Black][font=Verdana]本人表达带六个his的一个蛋白的片断,计算理论分子量是20kDa左右。用NI柱纯化并优化纯化条件,发现主要有约20kDa、约40kDa、约80kDa三条带。后来
2014年06月05日发布人:damingxia0904
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信息,你说的是不是国产的柱子?老板要求买进口的。qiagen和novagen的柱子怎么样?安玛西亚的预装柱卖多少钱呀?[/color][/size],[size=2][color=Black]
qiagen的纯化柱子很多都是针对6His
2013年07月29日发布人:remenb
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目前手上有一个别人构建的重组蛋白,含六个HIS标签,用QIAGEN公司的Ni-NTA supper flow纯化。
以前用《A handbook for high-level
2014年01月16日发布人:bgf5
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蛋白的立体结构使His标签没有完全暴露在外,与Ni结合不紧密。[/size],[size=2]嗯,您说的这种情况很可能发生。那是不是也有可能和填料有关呢?[/size],[quote]原帖由 [i]+小生怕怕+[/i] 于
2015年01月17日发布人:+小生怕怕+
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我已经成功在在我的目标蛋白的基因后连接了his尾巴,可是今天做亲和层析实验,发现我的蛋白全部从流过峰里面流出来了,洗脱峰中检测不到我要的蛋白?
我的蛋白是个六具体,我在c端加的尾巴, 我猜想
2014年06月10日发布人:bananapeople
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小弟用pET表达了带有his-tag的融合蛋白,然后用novagen公司的His-Bind kit纯化蛋白,200ul镍柱,35ml细菌培养物,采用离心法。SDS-PAGE(上样量15ul)图
2014年07月04日发布人:wu11998866
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实验室打算添置一些滴瓶,书上说有30,60,125毫升的,请问大家,在60到125之间的滴瓶还有吗?我感觉60偏小,125又偏大,呵呵,60ml的比较小 一般来说125ml的还可以 不算大 实验室基本上都用这两种的,朋友,问问销售吧。有可能有100mL或80mL,可以定做啊!!!,好像没有,60毫升
2010年11月09日发布人:YJLL09
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[size=2]我养Caco-2细胞,现在已经接种到6孔培养板的插入式小室(即在6孔培养板的每个孔中再加单独的小室,transwell,让Caco-2细胞长在小室的膜上),目前存在的问题是:1.细胞接种不均匀,我已在园内搜索了一些接种技巧
2021年12月10日发布人:NBA