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各位童鞋你们好,请教你们一个问题:我在用His-tag磁珠试剂盒纯化带有His标签的蛋白,为什么蛋白老是结合不到磁珠上去?以至于纯化效率极低。有人说是pH问题,变性洗净液的pH为8.0,用之
2013年06月05日发布人:wsll
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各位战友,我最近纯化一蛋白,先是用镍柱亲和纯化,然后用凝血酶切除his标签。切除是在室温过夜进行的,将酶切混合物加到透析袋,以去除切掉的his tag以及elution过程中的大量咪唑。透析液
2014年02月03日发布人:969
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!!,韩国human的超纯水?
你们用水都要进口的 啊 ?,说下我调试纯水出现的一些问题,希望能对大家有所帮助。
先说下我自己的一些事情,我毕业后在药厂做过质量管理,也做过化验,现在在仪器经销商做售后服务,主要做一些杂活,以及调试
2011年12月13日发布人:csq1985
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巯基乙醇,而我的蛋白正常构建中含有二硫键,是因为这个原因而使活性丧失吗?还有洗脱液中的咪唑也有影响吗?
2. 蛋白在N端带有的His标签也会影响他的活性吧!酶切之后没有先去除它就测活性会不会影响?
3. 各位应该有用过肠激酶吧!酶切之后跑电泳有酶的这条带吗?我的就没有。有时候酶切之后
2014年02月15日发布人:seven7
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大量乙氧基,能够与水形成氢键,因而具有良好的水溶性,同时又可溶于除乙醚、己烷、乙二醇以外的大部分有机溶剂。大多数蛋白质经聚乙二醇修饰后,除保留或增加其水溶性外,还可以获得在一些有机溶剂中的溶解性。在蛋白质溶液中,聚乙二醇无论是处于游离还是结合形式,即使浓度很高,对蛋白质分子都没有副
2014年05月09日发布人:韩梅梅
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=805792&ptid=382671][img]http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif[/img][/url]
用Grace的培养基PH值是多少啊? [/quote]
[size=3]PH6.5[/size],[size=2]
sf9常用无血清培养基悬浮培养。
2015年01月29日发布人:wsll
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在网上查了一个相关的说明书,其中介绍到:
Reconstitute with water to a concentration of 0.1-1 mg/mL.
我买
2012年05月18日发布人:8964357
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养了有半年的3T3-L1,最近做诱导分化实验,可总是失败,到分化后第4天,细胞不少死亡,而且周围有大量黑点,还有脱壁情况发生.
这使我对细胞本身产生了怀疑,因为这细胞是别人送给我的
2012年02月18日发布人:loli
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[size=2][color=Black][b]载体是pGEX
蛋白结构是GST-target protein-6His
纯化是用Ni-IDA纯化包涵体蛋白
电泳是SDS-PAGE变性电泳
不同的目的蛋白,表达均有图上
2023年07月15日发布人:ilovegaga
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我的重组蛋白带His标签,挂柱子前的cell-free体系是有活性。
柱子用含20mM 咪唑的binding buffer平衡好,样品挂柱子后不经任何处理,直接收集的馏分就已经没有活性了。
更不要说含80mM,250mM咪唑的
2015年10月27日发布人:无怨无悔