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[size=2][color=Black][font=Verdana]我表达的是一个71KD的重组蛋白,带6His标签,亲和基质用的是GE的HisTrap FF(1ml)
缓冲液条件为(均是说明书上推荐的):
结合buffer
2013年12月23日发布人:shkudo
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我很想请教一下GST fusion protein 实验过程以及其应用!
请多多指教!![/color][/size],[size=2][color=Black] 在用大肠杆菌系统
2013年07月26日发布人:zwsyrt
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在做一个蛋白纯化,4000个bp,pET28原核表达的,用HIS柱纯化,效果不好,总是挂不上柱子,或者挂上了浓度很低,我认为是太大的片断不容易挂柱,不知道还有没有更好的解释,怕他问啊,做了
2014年03月29日发布人:wzqzy
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=11443307&sty=1&tpg=1&age=0[/url]
根据蛋白版fangweibin119版主的建议,我在这里新开贴子,与同仁们交流。
如有同仁对磷酸化蛋白的Western blotting有问题,可在此跟贴交流。
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2013年05月06日发布人:箭头儿
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[size=2][color=Black][font=Impact]
请教his-tag标签蛋白纯化:
我用的是酵母表达的蛋白,带有his-tag,用的是Novagen公司的镍柱纯化试剂盒,buffer是试剂盒带的,镍柱需要自己做,我
2014年03月03日发布人:bangqi_k
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纯化his-tag蛋白的镍柱可以永久性再生吗?如果不能够,大概能够用多少次呢?
几丁质层析柱大家都是用5次就重新换填料吗?[/color][/size],[size=2][color
2013年06月08日发布人:小游abc
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不过是哪个效果还差得很远,his纯化应该能达到很高的纯度才对
祝好运![/color][/size],[quote]原帖由 [i]NBA[/i] 于 2014-2-8 11:22 发表 [url=http
2014年02月08日发布人:kulee
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[size=2][color=Black][font=黑体]
各位好,我最近在做一个his-tag蛋白纯化,37度诱导表达,跑SDS-PAGE电泳,看到目的蛋白表达了。纯化用的是NOVAGEN的Ni-NTA his-bind resin
2013年10月27日发布人:鹿奔奔
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[size=2][color=Black]我最近一直在做一个6His蛋白的纯化,用的是Ni离子吸附法,取样检测蛋白纯化纯度还可以,而且浓度也较高,但是用PH7.4的PBS缓冲液透析时,就有很多蛋白沉淀出来了,按说这个PH对一般的蛋白都没有
2013年06月08日发布人:7437654
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:GST纯化,从左至右:marker、穿透、冲洗、洗脱液1、洗脱液2、洗脱液3(3个洗脱液成分一样)[/color][/size],[size=2][color=Black]第二张图:HIS纯化,从左至右:marker、穿透、冲洗、20、50
2013年10月06日发布人:bs4665