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PP是聚丙烯,PE是聚乙烯,都是属于聚烯烃类的塑料。 PC是聚碳酸酯,俗称防弹胶,是工程塑料的一种,特点是透明,耐热,尺寸稳定。这几种塑料的食品级都可以用于食品和餐具,对人体危害最小是聚丙烯和聚乙烯。要根据使用要求,不存在最好。如婴儿奶瓶
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,转移至15ml离心管,2000rpmX2min,弃上清液。加入1ml冻存液(90%血清,10%DMSO),放入冻存盒内(盒内有异丙醇,以保证温度降低的速度),立即放入一80℃冰箱内,过夜,第二天放入液氮中,可以保存至少两年,如不放入液氮,可以保存三个月。 冻存液的配制:70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加,边滴边摇。
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℃/ min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。 (二) 细胞复苏 1. 从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快
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。食物如果要放微波炉,应先取下保鲜膜,否则温度在超过110℃,保鲜膜会出现熔化现象,留下人体无法分解的有害物质。5级材料:PP——聚丙烯。这种材料多用于制造餐盒,其熔点高达130℃,可以直接放进微波炉加热食物,清洗干净后可重复使用。6级材料
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,将预冷的冻存液加入消化完全的细胞中,用滴管轻轻吹打混匀.4.在每支冻存管中加入1ml细胞液,密封后标记冻存细胞名称和冻存日期.5.冻存步骤的细致直接关系到细胞复苏时的活力,如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐)最好;或者可以
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保存管中,1ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。
三、注意事项:
(1)欲冷冻保存之细胞应在生长良好(logphase)且存活率高之状态,约为80–90%致密度。细胞冻存前应保证细胞的活力好,无污染
(2)冷冻前
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的冻存液加入消化完全的细胞中,用滴管轻轻吹打混匀.4.在每支冻存管中加入1ml细胞液,密封后标记冻存细胞名称和冻存日期.5.冻存步骤的细致直接关系到细胞复苏时的活力,如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐)最好;或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐.这是我实验中用的protocol,
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实验室常用的离心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用的较多,因为玻璃的离心管不能用在高速或者超速离心机上。塑料的离心管又有PP(聚丙烯)、PC (聚碳酸酯),PE (聚乙烯)等材质。PP的管子性能相对来说比较好。塑料的离心管透明或者半透明
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二甲基亚砜是一种重要的渗透型细胞保护剂。在深低温(零下200度)保存细胞时冻存过程中,为防止细胞内液冰晶形成、渗透压改变、细胞结构紊乱等导致的损伤,有必要使用含有DMSO冷冻保护剂。DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中,降低冰点、延缓冻存
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把细胞消化下来(同5)并离心。用配好的冻存液把细胞悬浮起来,分装到灭菌的冻存管里,4℃冰箱30min,-20℃30min,-80℃过夜,写明细胞种类,冻存日期。然后放到液氮灌中保存。
冻存液的配制:50%的完全培养基+40