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kit,得到的基因组DNA是20kb左右,而且我用其他文献发表的用proteinK和SDS法,也是同样大小。由于有人说,至少是20kkb,所以我真是怀疑模板大小问题。但是抽提过程中,十分小心,不可能会出现断裂,电泳宣示十分好! 我在简并引物PCR时,模板一般是200ng左右。
我用了保生的PCR酶rTaq,很常规的
2015年12月04日发布人:tuuu2
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[size=2]各位大虾:
本人PCR两月有余,尚无结果。
我的目的片段是SERT(5-HT转运体)基因的启动子区,要做多态性研究,该片段GC含量70%多,共500bp左右,我用的是TaKaRa的LATaq酶加GC BufferI或
2016年01月07日发布人:中国特色
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均是新的。按说T载体应该很好连,现在很苦恼,不知问题出在哪,希望大家帮帮忙,不胜感激![/font][/size],[size=2]我一般是将扩增后的PCR产物用Gel Extraction Kit 回收,连接PMD19-T载体,16度连接
2015年02月16日发布人:cwcwcww
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[size=4][color=Black][font=新宋体][b][求助]仰天长哭,PCR条件摸索
请各位大虾看看小弟的PCR有什么问题?
我要扩增一219bp的片段
用25微升的体系,Mg我一开始用的1.5mM,dNTP
2011年10月08日发布人:百分比
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[color=Black][size=4][font=仿宋_GB2312][b]基因表达之RT-PCR之我见[转自“丁香园论坛”]
在论坛上看到不停地有人在问RT-PCR的问题,实际上在以前的帖子中各位香主和eeflying(我
2011年08月12日发布人:王六六
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[size=2]
中间的是Marker,两边分别是两种引物的温度梯度(Tm:55度、57度、59度、61度、63度)的pcr结果,拖尾现象好严重。。。。。100V,30min。前提是我酵母基因组提取的也不纯,有相近的两条带(重做还是两条
2015年09月04日发布人:西子
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[color=Black][size=2]梯度PCR结果如下:
上面一排是阳性对照,下面一排是一般标本。根据电泳图,我选择了50度作为最佳温度。[/size][/color]
[[i] 本帖最后由 iii_ii 于 2014-4-25
2014年04月21日发布人:iii_ii
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[color=RoyalBlue][size=4][font=仿宋_GB2312]紧急求教实时荧光定量PCR [转载]
我想做实时荧光定量PCR,是荧光染料法,仪器是Roche公司的,做绝对定量,想自己制备目标基因标准品,如何办
2011年09月15日发布人:海鸥crazy
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[size=2]大家好,我现在每天都在做PCR,每天也都在用枪,可是不知道怎么用枪才是最准确的,为了取样准确,为了防止枪的污染.
1:我在取样的时候总是发现枪头外有液体,这样就会不准了,不知道怎么很好的避免?
2:在PCR取样操作时
2015年09月01日发布人:PCR
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[size=4][color=DarkSlateBlue][font=仿宋_GB2312]请问:有关RNA提取和RT-PCR [转载]
试剂:RNA提取试剂盒(Promega公司)
RT-PCR试剂盒(大连宝生物公司
2011年10月04日发布人:INK