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还是不能结合上去,透析的目的蛋白也不见了
我自己分析一下原因,可能有几个1,his tag树脂不行,我用重生柱的,按照说明书进行(不知道大家用的是什么样的流程重生,我的是先用离子化缓冲液过柱,bindbuffer平衡后就加液体,采取了连续流过的方法,一次性过几十毫升);2,上清中盐离子浓度太高,初步算了一下,达到0.4mol的
2014年06月17日发布人:079777chao
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我已经成功在在我的目标蛋白的基因后连接了his尾巴,可是今天做亲和层析实验,发现我的蛋白全部从流过峰里面流出来了,洗脱峰中检测不到我要的蛋白?
我的蛋白是个六具体,我在c端加的尾巴, 我猜想
2014年06月10日发布人:bananapeople
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感染
不知道有多少人成功用杆状病毒——昆虫细胞表达系统成功进行过蛋白表达?我最近表达一段病毒的非结构蛋白nsp-6,构建的重组Bacmid质粒经PCR鉴定正确,可是进行表达时
2017年04月13日发布人:ffaa
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最近做表达,65KD的蛋白,使用pET268载体,准备柱纯化,不知道改选择哪个公司的柱子比较好?第一次接触,还望大家帮忙[/b][/color][/size],[size=2
2013年07月29日发布人:remenb
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[size=2][color=Black][font=Impact]我表达的蛋白大小在31 kDa左右。在N端有6个His.我在NATIVE 的条件下,用的binding buffer 50mM NaH2PO4, 500 mM NaCl
2013年12月13日发布人:fsdd817
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辅料不是成比例的变化,不同规格的制剂完全分开报。我们公司咨询过药监局的老师。,那API和辅料同比例的变化,不同规格的制剂可以整理到一套资料里吗?,可以的。比如制剂I,API 50mg 辅料150mg,制剂II API 100mg 辅料
2014年02月06日发布人:a456
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[size=2]偶用sybr green I 作real time pcr, 提细胞株的RNA经PROMEGA 的反转录合成cDNA,然后用SYBR GREEN I 在ABI 7000机子上作-Real time pcr。在上机前偶用普通
2015年12月04日发布人:伊莎贝拉
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细菌包涵体变性裂解方法。主要的目的是纯化蛋白制备单抗。采用的NI是NOVAGEN(NI-NTA HIs bind Resins)产品。步骤完全照说明书进行。 [/color][/size],[size=2][color=Black]这样的
2013年05月13日发布人:如影随形
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蛋白质是生命活动最终的控制者和执行者。在分子生物学研究中,往往会陷入一种尴尬局面:DNA编码了RNA,RNA也翻译成了蛋白,但却无法解释蛋白何时、如何、以及为什么被激活,从而
2013年05月22日发布人:NBA
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到目前为止,蛋白质结构解析的方法主要是两种,x射线衍射和NMR。近年来还出现了一种新的方法,叫做Electron Microscopy。其中X射线的方法产生的更早,也更加的成熟,解析的数量也更多,我们知道,第一个解析的蛋白的结构,就是用
2013年05月02日发布人:koook5695