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[size=2][color=Black][font=Verdana]我表达的是一个71KD的重组蛋白,带6His标签,亲和基质用的是GE的HisTrap FF(1ml)
缓冲液条件为(均是说明书上推荐的):
结合buffer
2013年12月23日发布人:shkudo
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我很想请教一下GST fusion protein 实验过程以及其应用!
请多多指教!![/color][/size],[size=2][color=Black] 在用大肠杆菌系统
2013年07月26日发布人:zwsyrt
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在做一个蛋白纯化,4000个bp,pET28原核表达的,用HIS柱纯化,效果不好,总是挂不上柱子,或者挂上了浓度很低,我认为是太大的片断不容易挂柱,不知道还有没有更好的解释,怕他问啊,做了
2014年03月29日发布人:wzqzy
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我冻了一批HEK293细胞,过程如下:
将T25培养瓶中的细胞消化离心后去上清,加入0.9ml的血清(4度),吹打均匀后吸出加入冻存管中,再加入0.1mlDMSO.颠倒混匀后用厚口罩
2012年09月08日发布人:dongdongqiang
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请教his-tag标签蛋白纯化:
我用的是酵母表达的蛋白,带有his-tag,用的是Novagen公司的镍柱纯化试剂盒,buffer是试剂盒带的,镍柱需要自己做,我
2014年03月03日发布人:bangqi_k
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兄弟最近在培养HEK293细胞,细胞是刚从美国ATCC买回来的,问题是复苏后几代,细胞表现出2种形态,请大家看一下,哪个是正常的,不正常的是什么原因呢
2012年05月18日发布人:star#room
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纯化his-tag蛋白的镍柱可以永久性再生吗?如果不能够,大概能够用多少次呢?
几丁质层析柱大家都是用5次就重新换填料吗?[/color][/size],[size=2][color
2013年06月08日发布人:小游abc
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不过是哪个效果还差得很远,his纯化应该能达到很高的纯度才对
祝好运![/color][/size],[quote]原帖由 [i]NBA[/i] 于 2014-2-8 11:22 发表 [url=http
2014年02月08日发布人:kulee
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最近在养293细胞,烦死了,明明长得很好,换一次液(同一批培养液)后就出现大片脱落,几乎没了,还等着冻存呢!
好几次这样了。
这是什么原因?请高手指教![/b][/color
2012年06月19日发布人:8964357
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[size=2][color=Black]我最近一直在做一个6His蛋白的纯化,用的是Ni离子吸附法,取样检测蛋白纯化纯度还可以,而且浓度也较高,但是用PH7.4的PBS缓冲液透析时,就有很多蛋白沉淀出来了,按说这个PH对一般的蛋白都没有
2013年06月08日发布人:7437654