-
[size=2][color=Black][b]
载体是pGEX
蛋白结构是GST-target protein-6His
纯化是用Ni-IDA纯化包涵体蛋白
电泳是SDS-PAGE变性电泳
不同的目的蛋白,表达均有图上那条比主
2013年11月09日发布人:purrr
-
[size=2][color=Black]
小弟用pET表达了带有his-tag的融合蛋白,然后用novagen公司的His-Bind kit纯化蛋白,200ul镍柱,35ml细菌培养物,采用离心法。SDS-PAGE(上样量15ul)图
2014年07月04日发布人:wu11998866
-
[size=2][color=Black][b]
目前手上有一个别人构建的重组蛋白,含六个HIS标签,用QIAGEN公司的Ni-NTA supper flow纯化。
以前用《A handbook for high-level
2014年01月16日发布人:bgf5
-
[size=2][color=Black][b]建立此帖目的是给大家提供一个蛋白芯片制备和应用方面的交流平台,有相关问题请在此发言:
愿在此就蛋白芯片的任何问题与大家交流分享,共同提高。[/b][/color][/size
2013年08月29日发布人:NBA
-
还是不能结合上去,透析的目的蛋白也不见了
我自己分析一下原因,可能有几个1,his tag树脂不行,我用重生柱的,按照说明书进行(不知道大家用的是什么样的流程重生,我的是先用离子化缓冲液过柱,bindbuffer平衡后就加液体,采取了连续流过的方法,一次性过几十毫升);2,上清中盐离子浓度太高,初步算了一下,达到0.4mol的
2014年06月17日发布人:079777chao
-
[size=2][color=Black]
我已经成功在在我的目标蛋白的基因后连接了his尾巴,可是今天做亲和层析实验,发现我的蛋白全部从流过峰里面流出来了,洗脱峰中检测不到我要的蛋白?
我的蛋白是个六具体,我在c端加的尾巴, 我猜想
2014年06月10日发布人:bananapeople
-
[size=2][color=Black]
相关疾病:
感染
不知道有多少人成功用杆状病毒——昆虫细胞表达系统成功进行过蛋白表达?我最近表达一段病毒的非结构蛋白nsp-6,构建的重组Bacmid质粒经PCR鉴定正确,可是进行表达时
2017年04月13日发布人:ffaa
-
膜蛋白,分子量为18KDa,分离胶浓度多少最合适啊!急...,12%就可以的,谢谢回复!
用短胶版试了一下蛋白跑的太快,太靠近前沿,效果不是很好,想看看是不是可以通过改变胶的浓度让它更适合分离这种小分子量的蛋白!,我们跑泛素,10k
2016年04月02日发布人:xiaoxiaojinglin
-
[size=2][color=Black][b]
最近做表达,65KD的蛋白,使用pET268载体,准备柱纯化,不知道改选择哪个公司的柱子比较好?第一次接触,还望大家帮忙[/b][/color][/size],[size=2
2013年07月29日发布人:remenb
-
细菌包涵体变性裂解方法。主要的目的是纯化蛋白制备单抗。采用的NI是NOVAGEN(NI-NTA HIs bind Resins)产品。步骤完全照说明书进行。 [/color][/size],[size=2][color=Black]这样的
2013年05月13日发布人:如影随形