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1. 内引物一般有2条,可以2条都是正向的,仅有最后一个碱基不同;也可以一条正向,一条反向的。你们觉得哪种比较好?
2. 内引物的参数多半由源序列决定,请问您如何处理好TM值,GC含量等问题;和外引物的TM值,GC含量有什么关系要注意吗?
3. 仅仅靠引物最后一个碱基的不同来判断扩增结果,如何区别假阴性与假阳性?换句话
2011年10月21日发布人:我佛慈悲
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前期了解到一些近红外设备,而去一些使用单位看过,有的单位的设备外联厂商服务器的,有的不外联暂且定义单机吧,大家来说说看你们的设备外联没有?
大家对外联服务器的看法?,设备外联厂商服务器,或许仅仅是NIR设备吗,是的 就是指的NIR设备
2014年12月23日发布人:shuishui
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sybr看引物在一起是否能产生特异性的产物.荧光定量PCR后跑电泳检测,现在发现有问题了,大家可以看荧光定量PCR扩增图中绿色的溶解曲线,一个在Tm为80左右的小峰对应的是电泳图上稍大一些的目的产物,而在Tm为86左右的的大峰对应的是电泳图
2011年08月13日发布人:七彩星星
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,我把第一轮的产物稀释了100倍,第二轮成糊状。
内外2个引物的TM值设计的时候都接近70度,按照要求设计,可是合成出来后引物单子上是63.62度。
是不是程序不合适?
请各位给一些建议,本人在此谢谢大家啦。[/size],[size
2015年08月05日发布人:月牙牙
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[/color][/size],[size=4]我刚做过5’、3‘ RACE,我个人的经验如下:
1、首先,提的RNA必须完整,最好跑个RNA电泳来验证一下;
2、设计引物时要注意:Tm最好大于70度,两引物间要有100-200bp的重叠区
2011年09月27日发布人:幽兰君
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的看看有不有,结果还是没有条带,做了touchdown 从60度降到45度,引物的tm值是50度,(引物合成公司给的),但是用primer5分析tm是58度.很奇怪.怎么办啊?换了很过酶都没有用.
后面分析模板是属于高GC含量的模板
2015年02月15日发布人:www.1
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在熔解曲线中明确的看到:在做标准曲线的时候,随着模板的减少(稀释度增加),引物二聚体的峰增大(其Tm值约为72度),而我的目的条带的峰减少(其Tm值82度左右)。阴性对照中也可以看到引物二聚体的峰。但是在扩增曲线中,由于无法把这两者分开
2011年09月21日发布人:了了
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2 GC content
35%-65%(ideally 40-60%)
3 Tm
60-70°C (ideally 65°C), so that annealing temperature is 58-62°C
ΔTm (forward primer and reverse primer)
2015年08月01日发布人:箭头儿
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致![/size],[size=2]应该和厂商关系不大的
所有质谱厂商的分子泵都是向专业的厂家购买的[/size],[size=2]我的TOF前段时间出现很刺耳的嗡鸣声,听声音来源就是分子涡轮泵,所以我强烈要求给换了个新的,就好了!
还没有见过这种
2015年05月19日发布人:童童
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半定量表达。查了很多原文都没有见过用大鼠做这方面的引物,Genekank中ID为NM_023981
1.for normal PCR
2.TM:55-62
3.product length:300-400bp
M-CSF
2011年10月24日发布人:如影随形