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?谢谢![/size],[size=2]我没理解你的穿透是哪种意思,呵呵
1,如果是250mM咪唑的洗脱液将你的蛋白洗脱下来的,这是正常的,250的咪唑就是为了洗脱蛋白
2,在10mM的情况下,蛋白就下来了,如果你的测序是正确的,那可能是
2015年01月17日发布人:+小生怕怕+
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][b]1)与DNA芯片不同,蛋白芯片不能直接在原位合成,而只能采用点样或喷墨方法制作。
2)制作蛋白芯片最大的难题在于如何将蛋白与基底材料有效结合的同时,仍能保持其原有的生物活性(免疫原性
2013年08月29日发布人:NBA
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小弟用pET表达了带有his-tag的融合蛋白,然后用novagen公司的His-Bind kit纯化蛋白,200ul镍柱,35ml细菌培养物,采用离心法。SDS-PAGE(上样量15ul)图
2014年07月04日发布人:wu11998866
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[size=2][color=Black][font=Impact]我原核表达的蛋白用QIAGEN公司的Ni-NTA Superflow进行纯化接着跑SDS-PAGE,我的目标蛋白是110KDA,但在50KDA时还有一条很粗的条带,在其
2013年11月08日发布人:jiushikeshui371
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QIAGEN的价格又降低了,值得用![/color][/size],[size=2][color=Black]谢谢!知不知道qiagen的1ml的预装柱多少钱一根?[/color][/size],[size=2][color=Black]不是所有国产的就不好,原来有个国家重点实验室也用进口的Ni-NTA的也用国产的,后来发觉没差别,现在一
2013年11月16日发布人:如影随形
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[size=2][color=Black][font=Verdana]本人表达带六个his的一个蛋白的片断,计算理论分子量是20kDa左右。用NI柱纯化并优化纯化条件,发现主要有约20kDa、约40kDa、约80kDa三条带。后来
2014年06月05日发布人:damingxia0904
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还是不能结合上去,透析的目的蛋白也不见了
我自己分析一下原因,可能有几个1,his tag树脂不行,我用重生柱的,按照说明书进行(不知道大家用的是什么样的流程重生,我的是先用离子化缓冲液过柱,bindbuffer平衡后就加液体,采取了连续流过的方法,一次性过几十毫升);2,上清中盐离子浓度太高,初步算了一下,达到0.4mol的
2014年06月17日发布人:079777chao
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目前手上有一个别人构建的重组蛋白,含六个HIS标签,用QIAGEN公司的Ni-NTA supper flow纯化。
以前用《A handbook for high-level
2014年01月16日发布人:bgf5
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我已经成功在在我的目标蛋白的基因后连接了his尾巴,可是今天做亲和层析实验,发现我的蛋白全部从流过峰里面流出来了,洗脱峰中检测不到我要的蛋白?
我的蛋白是个六具体,我在c端加的尾巴, 我猜想
2014年06月10日发布人:bananapeople
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相关疾病:
感染
不知道有多少人成功用杆状病毒——昆虫细胞表达系统成功进行过蛋白表达?我最近表达一段病毒的非结构蛋白nsp-6,构建的重组Bacmid质粒经PCR鉴定正确,可是进行表达时
2017年04月13日发布人:ffaa