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[size=2][color=Black][font=Impact]我得到的GST融合蛋白主要在包含体中,15ml菌液超声裂菌后用4M盐酸胍洗涤,再用6M盐酸胍溶解蛋白,后进行稀释复性,利用sepherose 4B纯化,跑SDS-PAGE
2014年05月26日发布人:杨过爱大米
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我用pGEX4T1融合GST表达我的蛋白,再用beads纯化。结果显示在纯化前,有我的目标蛋白,但是纯化后,仅在26KD附近有一条带,和GST大小差不多。请问高手们这是怎么回事啊? 结果见图
2013年07月31日发布人:nikonun
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我用pGEX4T1融合GST表达我的蛋白,再用beads纯化。结果显示在纯化前,有我的目标蛋白,但是纯化后,仅在26KD附近有一条带,和GST大小差不多。请问高手们这是
2013年11月18日发布人:lorri
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融合蛋白表达的不是很好,经sarkosyl处理以后是可溶的,用上清作纯化,做了两次什么都没洗脱出来.填料应该是没问题的,因为用来做空载体GST的纯化,洗脱出大量的GST.最近又用融合蛋白
2014年07月04日发布人:qiangren789
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[size=2][color=Black]我很想请教一下GST fusion protein 实验过程以及其应用!
请多多指教!![/color][/size],[quote]原帖由 [i]yayya[/i] 于 2013-11-15
2013年11月15日发布人:yayya
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我现在在纯化GST重组蛋白(表达是费了一个月的时间,好不容易搞定了,汗),遇到一个问题,请大家指教!
我的重组蛋白是不可溶的,加上GST为66KD,我是先把它挂上 sepharose 4B
2014年05月24日发布人:utt0989
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RT。
图中上清里有融合蛋白表达,但在纯化时跟GST磁珠不结合,请高手指教。
蛋白分子量未100kd左右
自左向右为:Marker,未诱导,诱导,未诱导,诱导[/color][/size
2014年03月13日发布人:kewanqi2011
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[size=2][color=Black]最近在表达一个蛋白,N端加了GST标签,C端加了HIS标签,分子量90kd左右,先使用GST,然后使用HIS亲和层析,但总有一条50kd左右的杂带无法去除,请大家分析一下,谢谢!
第一张图
2013年10月06日发布人:bs4665
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Glutathione Sepharose 4B,但不知道pull down是什么
就是用Glutathione Sepharose 4B亲和结合GST蛋白标记啊[/font][/color][/size],[size=2][color=Black
2013年10月08日发布人:standbyme
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[size=3][font=仿宋_GB2312][求助]小规格制剂的回收率怎么做?
请教各位大虾:
郁闷!
偶最近做一个片剂,规格100ug/片,片重100mg,辅料量是原料1000倍!分析方法为HPLC,做回收率试验时,若
2011年11月17日发布人:周伯通pp