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原代细胞分离培养鉴定以及检测等整体课题服务
氯仿,颠倒混匀10次,室温静置5min,4℃,12000rpm,离心20min; (3)转上层水相于另一新EP管中,加入等体积异丙醇,颠倒混匀10次,-20℃放置2h后,4℃,12000rpm
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RNA pull-down实验
静置2min。5. 在超净台内,于上述EP管中加入50µl LB培养基(Amp-),37℃,160rpm摇床,增菌0.5-1h。6. 菌液4,000rpm离心10min,弃大部分上清,将沉淀重悬,菌液
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RNA pull-down实验
静置2min。5. 在超净台内,于上述EP管中加入50µl LB培养基(Amp-),37℃,160rpm摇床,增菌0.5-1h。6. 菌液4,000rpm离心10min,弃大部分上清,将沉淀重悬,菌液
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组蛋白h4乙酰化检测
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组蛋白h3乙酰化检测
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Western Blot技术
1) 全蛋白的提取:将细胞用PBS洗涤2遍,每瓶加入RIPA裂解液400ul,用细胞刮迅速将细胞刮下转移到EP管中(剪取约20mg组织于
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蛋白表达纯化
至OD=0.6左右,加入IPTG,浓度梯度从25μM到1mM。37度诱导过夜(一般3 h以上即有大量表达)。2)SDS-PAGE电泳检测目的蛋白的表达。3)将有表达的菌株10%甘油保种,保存1mL左右
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基于h-nmr技术的代谢组学分析
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Co-IP
加入适量预冷的RIPA 缓冲液; 3. 用预冷的细胞刮子将细胞从培养皿或培养瓶上刮下,把悬液转到1.5EP管中,4°C,缓慢晃动(EP管插冰上,置水平摇床上); 4. 4°C离心后,立即将上清转移到
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q-PCR实验服务
Q-PCR实验流程一、 ①实验前准备,每天早上到实验室后,先把超净工作台的紫外灯打开15-20分钟。②超净台前做实验,需佩戴干净的橡胶手套/一次性薄膜手套,RNA抽提需带口罩。③取EP管/枪头时
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