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还是不能结合上去,透析的目的蛋白也不见了
我自己分析一下原因,可能有几个1,his tag树脂不行,我用重生柱的,按照说明书进行(不知道大家用的是什么样的流程重生,我的是先用离子化缓冲液过柱,bindbuffer平衡后就加液体,采取了连续流过的方法,一次性过几十毫升);2,上清中盐离子浓度太高,初步算了一下,达到0.4mol的
2014年06月17日发布人:079777chao
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[size=2][color=Black][font=黑体]最近相继自己审核或帮老板审核几篇蛋白质组学论文, 如果是基于SELDI或2DE技术的profiling, 审稿意见基本是拒绝发表, 无论IF多么低的杂志。当然不是所有审稿人的观点
2013年10月17日发布人:txwuyan
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blot检测不到!难道要换载体?,因为我后面要过镍柱纯化此蛋白!所以就算蛋白鉴定是对的,它不带His tag的话,该蛋白我也得不到啊!
是原使用的载体有问题吗??求助!求助!,[size=2][color=Black]测序验证下翻译后是否还带有his标签
2013年04月27日发布人:pengke1983
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[size=2][color=Black][b]
最近在养293细胞,烦死了,明明长得很好,换一次液(同一批培养液)后就出现大片脱落,几乎没了,还等着冻存呢!
好几次这样了。
这是什么原因?请高手指教![/b][/color
2012年06月19日发布人:8964357
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[size=2][color=Black]最近做表达,65KD的蛋白,使用pET268载体,准备柱纯化,不知道改选择哪个公司的柱子比较好?第一次接触,还望大家帮忙[/color][/size],[size=2][color=Black
2013年11月16日发布人:如影随形
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[size=2][color=Black][font=黑体]我表达的蛋白大小在31 kDa左右。在N端有6个His.我在NATIVE 的条件下,用的binding buffer 50mM NaH2PO4, 500 mM NaCl
2013年09月02日发布人:911
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[size=2][color=Black][font=Impact]我表达的蛋白大小在31 kDa左右。在N端有6个His.我在NATIVE 的条件下,用的binding buffer 50mM NaH2PO4, 500 mM NaCl
2013年12月13日发布人:fsdd817
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其他经典的好方法呢? 我是新人![/color][/size],[size=2][color=Black]
重组到pET或 pGEX系列载体里,你就可以通过his 或GST标签纯化它了.[/color][/size],我现在在做一个蛋白
2014年01月09日发布人:hustwb
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[size=2][color=Black][b] 目前,蛋白质组学的工作在做完质普之后,分析蛋白质在细胞内的功能,以及建立一系列的蛋白质表达信号网络都需要做哪方面的工作?请各位大虾指点![/b][/color][/size],[size
2013年08月08日发布人:NBA
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][/font][/color][/size],[size=2][color=Black]个人觉得,蛋白质组学后续的研究很多。但是很多实验室目前只是集中在蛋白质组学研究本身,并没有考虑到相关蛋白的真正功能。尤其是差异蛋白质组学研究,找到相关的
2012年11月30日发布人:wawa