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[color=Sienna][size=4][font=楷体_GB2312]PCR 引物设计及软件使用技巧 [转自 丁香园论坛]
PCR 引物设计及软件使用技巧
张新宇,朱有康,高燕宁
(中国协和医科大学中国医学
2011年08月20日发布人:微笑的海豚
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[font=宋体][size=4][color=DarkRed]关于长片断PCR [转载]
请问大家尝试过的最长片断的PCR有多长啊?
我想做3000bp左右的PCR,用高保真的DNA聚合酶,可是几次扩增出来的只有1000bp
2011年09月21日发布人:蚊子
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[size=3][color=Red][font=楷体_GB2312][b]SYBR Green PCR [转载]
前段时间订购回了SYBR Green 试剂,再进行实验发现阴性对照有扩增,
于是换了反应管,tip,灭菌水
2011年09月23日发布人:楚留臭
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[size=4][color=Navy][b]如题:专攻PCR,有问题尽管问!~尽我所能回答~[转载][/b][/color][/size],[size=4]http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid
2011年09月19日发布人:微笑的海豚
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[size=2]PCR引物设计软件[/size],[size=2]
强烈推荐PP5.0[/size],[size=2]软件的网址:[url]www.med.jhu.edu/medcenter/primer/primer.cgi[/url
2023年02月24日发布人:西子
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最后由 天蓝 于 2010-7-20 22:53 编辑 [/i]],细看该片,才发现是一层黑色的和一层透明的贴合在一起的,冷不丁看,只看到黑色,忽略了透明的那层PP。用小刀切下黑色部分,相同条件再做。
[attach]5233
2010年07月20日发布人:boss
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里加一点酸 防止拖尾,浓度高的可能性大一点,降低点样浓度;
另可根据样品的性质,加一点酸或碱,可根据样品的性质,加一点酸或碱,拖尾原因可能是:
1 上样量太大或浓度太高,不妨降低浓度或者点板时每次少点点,吹干后再继续点样
2 洗脱
2012年03月13日发布人:wxw1981_2001
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[size=2][font=黑体]你有pcr扩不出来的情况吗?分析过原因是什么呢?[/font][/size],[size=2]找不到合适的退火温度,延伸时间,退火时间等等[/size],[size=2]
一般都是引物或条件问题
2014年08月26日发布人:莓菓333
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方法
3,采用降落PCR
对于楼主的问题,建议采用降落PCR,你的后23个循环,可以每循环降低退火温度0.2-0.3度,或者加大Mg的浓度
此外不要为了加大产量,就轻易的增加摸板用量,有的时候加大摸板用量也有可能抑制PCR,反而降低摸板用量
2016年04月04日发布人:fei1226com
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扩增效果相对较好,但目的片断产量很少,无法回收,请老兄不惜赐教!![/size],[size=2]
已经有目的片断产量很少时,可以用PCR产物作为模板,条件严格一些再进行一次扩增,估计能够得到足够的量。[/size],[size=2]关于
2015年12月01日发布人:园丁##