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,引物(5uM):2ul, dNTP(2.5mM):1.6ul, Mg2+(25mM):1.2ul,10×Baffer: Tris-HCL:20mM, KCL:20mM,反应条件:94 ℃ 5分钟,94℃30秒,61℃30秒,72℃30秒
2011年10月11日发布人:中国特色
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[size=2][font=Verdana][color=Black]
我做WB快两年了,以前一直都很好,跑出来的条带都很亲清晰,不过最近的结果太差了,找了好久的原因也没找到,请有经验的不吝赐教:
我以前用的是25mM Tris
2014年05月31日发布人:wood533
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软件升级以后就界面的坐标处就变成UU了,量距离不方便,怎么把它变成mm呢?多谢各位!,uu是user unit,即用户自定义的单位,不想用的话可以,在STAGE下拉菜单中把USER UNIT前的勾点掉就可以了,楼上说得太好了!!!68.GIF 68.GIF 68.GIF
2009年10月26日发布人:888
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[size=2][color=Black][font=Impact]
用Ni sepharose 6 fast flow纯化His-tag 蛋白,刚开始做,先做了咪唑浓度梯度的优化,用了20,60,100,200,300mM的咪唑浓度
2013年07月22日发布人:shanzhapia696
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[size=2][color=Black]是指这种缓冲液中含有 10 mM sodiumphosphate, 150 mM sodium chloride, 1 mM MnCl,, and 1 mM CaC12,并且PH为7.0.
2014年04月12日发布人:applebook=213
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[size=2][color=Black]目前我在表达一个26k左右的蛋白,pET32a载体,可溶性表达,带有Trx标签,500mM咪唑,20mM磷酸盐,PH 7.4洗脱,因为要做EK酶切,打算把体系置换为磷酸盐缓冲体系,然后过SP去除
2013年07月31日发布人:quiqui008
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Buffer。找了两个配方:
1: Mgcl2, Tris-HCL(PH 8.4), KCl, betain(终浓度分别为 15mM, 100mM, 500mM, 1M);
2: Mgcl2, Tris-HCL(PH 8.4), KCl
2015年12月01日发布人:xue258
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这么久。。。。。。[/color][/size],[size=2][color=Black]
咪唑浓度你用多少了啊?[/color][/size],用20mM\60mM\100mM\500mM的梯度,结果60mM就将目的蛋白洗下来很多,到
2014年03月29日发布人:wzqzy
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廉价的代价做出超值的结果。
废话少说,我先说说自己的几点体会吧,也算抛砖引玉。
1)SDS-PAGE电泳缓冲液可以反复用:只要保证内槽的缓冲液是干净的,外槽用旧的缓冲液就可以了;
2)半干转膜用的3MM滤纸也可以反复用:一定要标记
2013年08月03日发布人:toy
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[/size],[size=2]流速1.0 还有提高流速的空间 可以把流速设为1.5 或者2.0试试 再者就是升高柱温 我不知道你现在用的是什么柱子 你也可以换柱子 柱子的尺寸有 250mm 150mm 100mm
2016年03月28日发布人:1221