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目前手上有一个别人构建的重组蛋白,含六个HIS标签,用QIAGEN公司的Ni-NTA supper flow纯化。
以前用《A handbook for high-level
2014年01月16日发布人:bgf5
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小弟用pET表达了带有his-tag的融合蛋白,然后用novagen公司的His-Bind kit纯化蛋白,200ul镍柱,35ml细菌培养物,采用离心法。SDS-PAGE(上样量15ul)图
2014年07月04日发布人:wu11998866
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信息,你说的是不是国产的柱子?老板要求买进口的。qiagen和novagen的柱子怎么样?安玛西亚的预装柱卖多少钱呀?[/color][/size],[size=2][color=Black]
qiagen的纯化柱子很多都是针对6His
2013年07月29日发布人:remenb
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我已经成功在在我的目标蛋白的基因后连接了his尾巴,可是今天做亲和层析实验,发现我的蛋白全部从流过峰里面流出来了,洗脱峰中检测不到我要的蛋白?
我的蛋白是个六具体,我在c端加的尾巴, 我猜想
2014年06月10日发布人:bananapeople
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蛋白的立体结构使His标签没有完全暴露在外,与Ni结合不紧密。[/size],[size=2]嗯,您说的这种情况很可能发生。那是不是也有可能和填料有关呢?[/size],[quote]原帖由 [i]+小生怕怕+[/i] 于
2015年01月17日发布人:+小生怕怕+
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R2,R3部分的电路,仍然可以看作是10楼上面的那张图。
按差模和共模的关系, 差模为电源,而共模为公共阻抗。,事实上,R2,R3也有公共阻抗。如上图所示。在右图中,显然如果R2,R3 的回路能够增大电阻,那么根据叠加定理,共模Vc
2016年03月22日发布人:燕子@
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求助各位大仙:
最近遇到一个项目,原研胶囊辅料有乳糖,MCC,交联羧甲纤维素钠,MS。粉末直接灌胶囊,其中主药所占百分比不到3%主药在0.01盐酸中略溶,其他三种溶出介质中微溶。主药粒径小,能过120目;其他辅料过100目,乳糖80目。混粉过程采用等量递加,且多次过80目筛混合。感觉混粉静电强
2014年05月08日发布人:momom
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眼看着都要过年了 苦逼的我们 还在做实验 !
HPLC中做标曲 相关系数R2 一定要3个9吗“? 我得到了都是0.997 算出样品中的浓度还可以 不知道发文章的时候 编辑会不会很严谨?,发文章应该可以了!,一般要求至少要3个9,但是要是
2012年01月27日发布人:awingerbo
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还是不能结合上去,透析的目的蛋白也不见了
我自己分析一下原因,可能有几个1,his tag树脂不行,我用重生柱的,按照说明书进行(不知道大家用的是什么样的流程重生,我的是先用离子化缓冲液过柱,bindbuffer平衡后就加液体,采取了连续流过的方法,一次性过几十毫升);2,上清中盐离子浓度太高,初步算了一下,达到0.4mol的
2014年06月17日发布人:079777chao
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载体是pGEX
蛋白结构是GST-target protein-6His
纯化是用Ni-IDA纯化包涵体蛋白
电泳是SDS-PAGE变性电泳
不同的目的蛋白,表达均有图上那条比主
2013年11月09日发布人:purrr