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3.05mm 纯碳膜(不要Formvar支持膜的) 铜网(方孔 200 mesh), 要求碳膜上有孔, 孔径大小无要求, 孔大小可以不均匀.
谢谢
========再次更新=========
谢谢大家的信息
这帖子居然顶了两页
2015年06月04日发布人:但是
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,就跟没转似的,我要疯了!!!!!求有经验的指导啊!!!![/font][/color][/size],[size=2][color=Black]
胶和膜的位置放反了吧。
多问一句:你的电泳液如何配的,进行预处理了吗?
转膜时实时电流
2014年03月11日发布人:pengke1983
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300mA,1h;我也试过,不行?
请高手指点![/font][/color][/size],[size=2][color=Black]
按你说的条件,转膜应该没有问题,你要检查一下
1、要保证转膜三明治的顺序,膜和胶放反了肯定
2013年06月05日发布人:avi317
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/3.0A/300W),目的蛋白38KD,30MA恒流转160分钟,用的PVDF膜是师兄留下来的,也不知道是哪个公司产的,DAB显色,效果还不错.
现在分别用了millipore和北京中杉的PVDF膜,孔径是0.45um,同样的条件做
2013年07月10日发布人:misswu61
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。然后立即向平皿中加入不含甲醇的转膜液,使甲醇的终浓度在20%,将凝胶和膜以及滤纸在其中平衡30min左右即可转膜,在整个过程中注意不要让膜干了,如果膜干了就需要重新活化。注意操作中不要划伤膜或者弄脏膜,否则显色后会出现痕迹,干扰结果判定。膜的孔径也是
2014年06月27日发布人:kulee
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想请教一下大家,strip液作用的原理是什么?是否能将一张膜再生后做同一种抗体的western blot呢?刚开始做WB,请大家多多帮忙。谢谢![/font][/color
2014年02月13日发布人:bangqi_k
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我们用0.2um的PVDF,不知应该转多久?
另外,预染marker加多少?
怎么没次转都会透到滤纸上去,膜上什么也看不清楚?即使转10分钟也如此!why?[/color][/size
2014年06月26日发布人:any333
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25分钟有点短。
转膜条件需要摸索。
个人经验,27Kd,250mA, 1小时足够了。[/color][/size],[size=2][color=Black]
我看这里讨论的转膜时间
2014年03月28日发布人:dog002
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从以下几方面考虑:
1.膜(若是PVDF膜)有没有作预处理啊,需要在甲醇里泡15s以上,由不透明变为半透明,使之由疏水性变为亲水性;
2.适当增大转膜电压或延长时间,考染胶后,主要看65kd
2014年05月10日发布人:zranqi_1
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[b][size=2][color=Black]各位老师,我以前转膜都是150mA半个小时(这个我也很疑惑,为什么这么短时间),后来发现滤纸和膜一样大小时,转得100min,转半个小时大部分都在胶上(原因难道是由于滤纸直接互相接触,电流
2013年04月27日发布人:韩梅梅