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高手指点一二[/size][/color],[size=2][color=Black]
建议恒流,理由如下:
1.转膜中热量产生很多,导致缓冲液甲醇的挥发消耗,缓冲液成分变化,如果恒压会导致电流不断改变,转膜过程不平稳.
2.调节到恒流后,电压会变化,但是缓冲液中带电粒子运动稳定,有利于转出高质量的膜.
3.一般小分子蛋白(
2014年02月22日发布人:wawa
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[size=2][color=Black]采用的是tricine-SDS-PAGE胶跑电泳,但是省去了中间的space胶,每孔上样量15ug以上,半干转膜时电流采用60mA,1h,PVDF膜(45nm),电转液按照takara目录后的配方
2013年07月27日发布人:any333
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那种细胞培养平,一瓶的细胞(大概1,000,000细胞)提取出来的蛋白只有1~200ug的话,是否提取不完全呢?我将细胞放在裂解液,冰上裂解2个小时再离心的,这样有问题吗?[/color][/size],[size=2][color=Black]100V,30miN都够了....
你的目的蛋白才28KD...
转久了,就只剩大分子量的蛋白在膜上了,
2014年03月10日发布人:mickeylin
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最近刚又湿转改为干转,原先师姐的条件是固定60V,75mA,1小时,她作得挺好的。师姐走后,我用她原来的条件,总是发现正极的滤纸焦黄焦黄的,膜也烤糊了,ECL显色背景很厉害,而且有些指标
2014年03月03日发布人:is2011
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在AAO模板孔内镀了两层膜,AAO是带有铝基的单通模板,孔径为50个nm,孔深1μm,所镀膜层厚度约为10nm(只是理论估计),我想确认一下膜的厚度及膜在孔内的覆盖情况,如何在不损伤膜的质量的情况下获得比较好的断面?求高人解答。
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2015年08月26日发布人:钻石
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marker,转膜条件:湿转,恒流自80-300mA,1-4小时都试过了.在胶上还可见少量大分子量的marker时,不论是凝胶还是膜上均不见75KD以下的小分子量的marker。延长转膜时间大分子量的marker均转至膜上,仍不见小分子量的
2014年02月15日发布人:u234
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我们想买石墨炉、火焰一体机,想比较下耶拿700,700P以及PE900这三种产品的优缺点。主要问题有:
(1)耶拿700P与PE900是同一档次吗?耶拿700更高一档次?
(2)连续光源的原子吸收光谱仪同锐线光源比有没有
2016年01月04日发布人:ass
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各位大侠,我要做western blot,但公司说PVDF膜有两种,一种是0.2um的,一种是0.4um的,我要检测的蛋白一个分子量是185kD,一个是70kD,请问,我应该选哪种PVDF膜
2014年05月10日发布人:uuooii
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大分子量蛋白不加,因为大家用的膜都是0。46um孔径的,小分子用甲醇效果好。[/color][/size],大分子量蛋白不加,因为大家用的膜都是0。46um孔径的,小分子用甲醇效果好
2013年07月08日发布人:cbou876
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[size=2][color=Black]目的蛋白是120和130kd,几次都没有出目的条带,但是内参b-actin出的还好。
这两次转膜后对胶考染,发现100kd以上的片段,残留很多。不知是不是转膜不完全引起的目的蛋白条带未出
2013年12月20日发布人:芙蓉宫主