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尊敬的各位:
您好!
请教一个问题:
我扩增的PCR产物电泳结果如图, 拖尾严重!!
唉!
请赐教!
[/size],[size=2]
实在是太夸张了~~~
能不能说明一下你扩的样以及条件
2015年08月29日发布人:了了
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Master Mix ),PCR循环条件:
94℃预变性3min,进行如下循环:94°变性30S
55°退火30S 72°延伸30-40s, 30个循环, 最后72°延伸5min
望各位高手指导啊,谢谢 [/b][/font
2011年08月24日发布人:海鸥crazy
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融合载体
起初我也查到相关菌落pcr的文献,和导师商量,导师一口回绝了
他的理由和我所搜集到的理由一样:假阳性
我们实验室一博士师姐需要做一个真核表达载体
挑选了60个菌落,运用目的基因的上下游引物做PCR,出来条带的
2015年03月10日发布人:queen
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[size=2]请问有没有谁用过这个染色液的呀?在哪儿买的?除了invitrogen还有哪家公司有吗?想买次数少一点的,100次以内就行[/size],[size=2]我只用过invitrogen的,貌似这个也是paper中最多见到的[/size],[size=2]好像只有这个,没别的
如果用的少
2016年03月05日发布人:IAM007
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[size=2]最近做实验,很久都P不出来东西。经老师指导,换了一组pcr用的试剂。p倒是p出来东西来了,可是,在用水做空白对照组也出现特异性条带来。假阳性特厉害。后面我只用水做模板,加什么引物就出现相对应的特异条带。同时,我做了很多
2015年03月10日发布人:莓菓333
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[color=Black][size=4]菌落PCR——求助 [转载]
之前做RT-PCR,一直没做出来,P出的是700左右的带,我要的是1500的。
问别人要了含有这个片段的质粒,换了个上游引物,然后做菌落PCR,P出的还是
2011年09月16日发布人:pou
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[size=2][b] PCR条带太浅,试了很多原因都没有改进。直接上图,求大神指教[/b][/size],[size=2]
1. 是不是你的胶染色不行啊,连marker都挺浅的,加大染料的用量试试。
2. 你PCR几个循环啊,加大
2014年10月26日发布人:boom
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各位战友,我做pcr扩增700多bp的条带,退火温度59°,延伸时间1分30秒,引物二聚体很亮,没有目的条带,不知道是怎么回事,我的引物碱基长度是26个bp.marker的最后一条是100bp[/size],[size
2015年08月05日发布人:987789
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PCR,引物浓度需要摸索,先从最低开始--可以考虑0.04uM。然后看哪条带不够亮那么就增加那条带的引物浓度,0.02地望上加。
注意一定要使用Taq而不能用有extaq, pfu, pyrobest这些有3'末端外切活性的。
或者考虑采用
2016年04月08日发布人:天蓝蓝
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[size=2]我做了组织的RNA提取,过程很顺利,测OD值260nm/280nm=2.4,做RT-PCR,然后跑电泳,结果除了引物二聚体和RT-PCR试剂盒自带的阳性对照以外,没有β-actin出现,也没有目标产物的出现。请问结果怎么
2015年12月01日发布人:yonger