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我用Ni柱纯化一个大约28kd的蛋白,过完柱子跑电泳发现第一次(20M的咪唑)就把目的蛋白洗下来了,目的蛋白没有挂到柱子上,不知道是什么原因,恳请那位高手给予指点,谢谢![/color
2023年08月18日发布人:jrwyyplt
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[size=2][color=Black][b]各位同仁:
近期要做单抗纯化,希望免疫小鼠后从血液或腹水中纯化得到单抗,单不知抗原与sepharose /sephadex 结合如何操作,以及选柱问题,希望各位赐教,如果大家有相关资料
2013年11月17日发布人:minran_1980
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各位战友,大家好,我是一个原核表达纯化的新手,手里有两个待纯化的蛋白,准备纯化脱盐后给细胞用。
蛋白是在N端有6his标签,用的是Ni柱纯化(AKTA一款比较老的纯化仪)。
大致步骤如下
2013年06月19日发布人:utt0989
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相关疾病:
先天性卵巢发育不全综合征
最近在做中蛋白的纯化, 由于上样液比较粘稠,而导致上样后填料结块、堵柱等问题,做小试的时候通过0.45ul的膜过滤后可以上样,但是过滤速度极慢,不适合放大。另外,该蛋白由
2015年08月06日发布人:ha111
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我用原核表达蛋白质,8M尿素融解包含体,镍柱纯化后,想加到细胞培养液里面去。不知道这样纯化的蛋白质溶液里是否还有LPS之类细菌成分的杂质?因为蛋白的量比较少,不能过滤。不知道
2014年05月17日发布人:kulee
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各位好,我最近在做一个his-tag蛋白纯化,37度诱导表达,跑SDS-PAGE电泳,看到目的蛋白表达了。纯化用的是NOVAGEN的Ni-NTA his-bind resin
2013年10月27日发布人:鹿奔奔
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[size=2][color=Black]我最近一直在做一个6His蛋白的纯化,用的是Ni离子吸附法,取样检测蛋白纯化纯度还可以,而且浓度也较高,但是用PH7.4的PBS缓冲液透析时,就有很多蛋白沉淀出来了,按说这个PH对一般的蛋白都没有
2013年06月08日发布人:7437654
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各位同僚好,我是新手,过去对蛋白质学了解不多,但现在要做细菌包内酶的分离纯化试验,目前头绪很少,请各位高手帮忙指点一下。不胜感激!!![/color][/size],[size=2
2014年07月05日发布人:101010
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具体操作指南你可以在Qiagen网站上下载到,可以说比较详细了。
用过这个试剂盒,无论在自然状态下纯化,还是在变性条件下纯化,都比较方便。离心的时候,尽量用最低的转速;如果在变性条件下纯化,要调好溶液的pH值。[/color][/size
2014年04月05日发布人:shkudo
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我现在在做PGEX-4T-2的原核蛋白表达和纯化。通过SDS-PAGE证实已经有融合蛋白的表达。下一步我想进一步做蛋白大量表达以及纯化,用于以后的活性检测和动物实验。但不知该
2013年11月07日发布人:ero11