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分离模式使得疏水层析成为高盐洗脱后理想的纯化方式,是分离纯化抗体、重组蛋白质、疫苗、多肽、核酸等大分子的有效手段。 分子排阻层析 分子排阻层析(凝胶过滤)属于非吸附层析,是一种根据生物分子的大小及形状来分离物质的层析方法,因此选择凝胶
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你要确定你PCR有没有扩增出条带,先用检测胶点了看一下。如果检测胶可以看到条带,回收胶看不到的话,可能是你PCR的产物的量太少了,回收胶胶孔宽,PCR结果不好的条带可能就看不到了。如果你确定你的PCR的产物是有的,明亮的,但是跑回
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兼具卤钨灯光谱范围宽和LED性能稳定寿命上的优点,在中高端定量PCR仪中使用较多,但需要注意的是各个厂商所使用的白光LED性能各异,有些劣质LED的光谱范围不够平均,就会导致某些特定激发通道的光强明显低于其他通道。在定量PCR设备中主要
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部分纯化标本中的核酸。多数样品需要经过SDS和蛋白酶K处理。难以破碎的细菌,可用溶菌酶加EDTA处理。所得到的粗制DNA,经酚、氯仿抽提纯化,再用乙醇沉淀后用作PCR反应模板。
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过滤量 T/H : 0.05-20 滤器使用压力 mpa : 0.1-0.6 滤机规格蕊数:1,3,5,7,9,11,13,15 滤器使用温度 °C : 5-55 过滤精度(um):0.1、0.2、0.45、1-60 过滤
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过滤时,使用前必须根据被滤介质的理化性质选用合适的微孔滤膜。作为微孔滤膜的材料有很多种,其性能又有所不同。常用微孔过滤膜有如下几种:(1)水系微孔滤膜:一般用于纯水相的过滤。在过滤含有机相的混合溶剂时应尽量避免使用水系滤膜,以防滤膜被溶解
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瓷板上,然后才能进行过滤。 过滤时,先将澄清的溶液沿玻璃棒倒入漏斗中,滤完后再将沉淀移至滤纸的中间部分。吸滤瓶内的滤液面不应达到支管的水平位置,否则滤液将被水泵抽出。当滤液快上升至吸滤瓶的支管处时,应拔去吸滤瓶上的橡皮管,取下漏斗,从吸滤
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PCR产物的回收纯化的目的是:高质量DNA;除去蛋白(如酶等),RNA,无机盐(NaCl超过150 mM对T4连接酶有抑制作用),小于100 bp的短片段(如引物DNA),有机小分子(如dNTP、Agrose、EB、甘油、矿物油)。
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放射自显影,就可以进行序列判读。 二、材料 (1)DNA模板PCR产物离子交换色谱纯化,作为DNA模板,浓度为:0.01——0.1mmol/L。 (2)引物20个核苷酸的DNA引物可以不经过纯化,直接用作测序引物,引物浓度 l
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一 、模板质量问题:1)模板提取不完整,其中不含你的目的基因,或目的基因含量太低。可以跑个电泳看看提取的DNA,PCR阳性样品与阴性样品是否有明显差别。如果确定是这种问题,可以增加模板量试试,但不一定行得通。2)模板里面残留某种试剂成份