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电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑:1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多.对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度
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电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑:1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多.对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度
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DNA分子带负电,从琼脂糖凝胶的负极向正极泳动,速度依赖于其分子质量。小的紧密的DNA分子的较大伸展片断容易穿过琼脂糖介质。依据所要分离的
DNA分子的大小来选择琼脂糖的浓度,例如质量浓度3mg/ml的琼脂糖用来做DNA大片段电泳
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想分析这种结果, 首先,写明你在做什么样的实验,使用的是什么材料、什么技术,实验目的是什么。 其次,写明每块胶浓度多少,每个加样孔里是什么样品,marker每条带对应的是多大的DNA。 再次,写明哪些条带和你预期结果一致,哪些条带和你预期结果不一致。 最后,写明结果不一致有哪些可能原因。
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的循环是可取的。 2. 琼脂糖:不同厂家、不同批号的琼脂糖,其杂质含量不同,影响DNA的迁移及荧光背景的强度,应有选择地使用。 3. 凝胶的制备:凝胶中所加缓冲液应与电泳槽中的相一致,溶解的凝胶应及时倒入板中,避免倒入前凝固结块。倒入板中的
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【目的要求】1.掌握限制性核酸内切酶概念、特点及作用原理,DNA酶解技术的应用2.掌握琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段原理及其操作3.熟悉电泳基本原理及其影响因素【教学内容】1.限制性核酸内切酶概念、特点及作用原理,DNA酶解技术的应用
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如果DNA出现降解或者是混有其他杂质,例如蛋白质、RNA的话,那么琼脂糖凝胶就能够检测得到DNA的质量。标准主要是通过观察电泳条带的亮度,通过亮度就可以粗略地计算出DNA条带的含量。如果DNA出现损失,对应的条带就会变暗或者是消失。线性的
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从生物样品中提取DNA(DNA一般都有部分的降解),可运用PCR技术扩增出高可变位点(如VNTR系统,串联重复的小卫星DNA等)或者完整的基因组DNA,然后将扩增出的用DNA酶切成DNA片断,经琼脂糖凝胶电泳,按分子量大小分离后,转移
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琼脂糖凝胶电泳的操作。实验材料:质粒DNA、BAC、植物总DNA或它们的酶切产物。实验原理:在pH值为8.0~8.3时,核酸分子碱基几乎不解离,磷酸全部解离,核酸分子带负电,在电泳时向正极移动。采用适当浓度的凝胶介质作为电泳支持物,在分子筛
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琼脂糖凝胶电泳仪是以琼脂糖凝胶作为载体的电泳,广泛用于核酸的研究,为DNA分子及其片段的分子量测定和DNA分子构象分析提供了重要手段。不同浓度的琼脂糖凝胶分离DNA段的范围如下:一、凝胶总浓度:0.3%dsDNA段的分离范围:5~60kb