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做RT-PCR的人确实很多,我也算是做了近8个月了,做出的条带虽然非常的漂亮,但感想是,这项技术定性还凑和,半定量就不行了。首先是内对照和目的基因之间多少存在竞争,其比值本身就不宜定量;第二,结果不能重复
2015年07月02日发布人:yonger
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我做的RT-PCR已经结束了,可是数据处理不懂,怎么处理CT值?请内行指教![/size],[size=2]
什么是ct值?[/size],[size=2]
问题不明确,不同的实验目的数据处理方式不同。
做绝对
2016年01月06日发布人:jkobn
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引物浓度过高会出现什么情况,我是用的20UM,谢谢回复[/size],[size=2]
下面的图是我昨天的结果,我是把我师姐已经做好的课题的引物拿来做预实验。反应体系及条件都是用她的。
RT步骤:
硫酸镁
2015年07月01日发布人:memory
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[size=4][color=DarkGreen]RT-PCR如何设置对照? [转载]
看到文献上有阴性对照,请问如何设置,作用是什么?另外引物为什么要跨内含子设计?还是不怎么明白的说:( [/color][/size
2011年09月24日发布人:smile_smile
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?
请各位大侠指教!!!! [/size][/color],[size=3]绝对是可行的,不过rna的完整性还有RT酶的活性要求高
偶下个星期就要做一个5k的片断
但是如果要做后续步骤比如表达
就要考虑PCR反应的保真能力了;
BTW
2011年09月15日发布人:babybabe
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[size=4][color=Black][b][求助]求救RT_pcr,结果老是不稳定啊。看来需要调整
我得RT-pcr就是跑不出来。用的是tarkalar的一步法试剂盒试剂盒提供的阳性对照有的可以跑出来,说明试剂盒应该是好的
2011年10月12日发布人:乌贼老弟
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本人刚接触实验有一事不明,RT-PCR和Realtime-PCR这两种方法分别在什么情况下选择呢?比如我想看某一个传导通路是否在基因水平上影响某蛋白的表达是不是只做RT-PCR就可以了呢。谢谢各位大侠[/size
2016年02月09日发布人:ROSE李
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相关疾病:
先天性卵巢发育不全综合征46XX性发育睾丸疾病视网膜母细胞瘤
不好意思,本来很好的一篇文章,我又不知道怎么传上去,你就先凑合看一下,感觉好的话我用邮箱给你传过去
第一章 PCR和RT-PCR
2015年10月09日发布人:yes4
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[size=2]本来是做普通RT-PCR的,但是老板突然改变注意想做荧光定量RT-PCR,举手无错啊,请大家帮忙,把具体步骤告诉我.我已经读了一些此类文章,但是就是没有一个完整认识....谢谢各位大侠...
另:real-time
2016年02月05日发布人:8s5g
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[size=4][b]关于VEGF的RT-PCR [转载]
我做正常人血液中单个核细胞VEGF的RT-PCR,已经做了快两个月了,但结果都是一样的:内参非常好,VEGF基因不表达。我已经用梯度PCR仪改了不少条件,但还是没有结果
2011年09月20日发布人:qqq111