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[size=2][font=黑体]我用半定量RT-PCR法分析癌基因表达情况,现在分别得到扩增后的癌组织和癌旁组织电泳凝胶成像照片,包括marker、b-actin和目的基因的条带,请教各位高手几个问题:
1.如何根据图像分析差异的
2016年02月09日发布人:蒲公英
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[size=4]半定量Rt-Pcr的误差有这么大么?? [转载]
我在做半定量Rt-Pcr 如下图。跑出来发现平行样的亮度差异颇大。
实验设计:
共有4个cDNA的样本,分别命名为A,B,C,D,检测其中某基因表达的差异
2011年09月23日发布人:邓布利多
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我跑pcr三个月了,提细胞总RNA,反转录之后pcr,每次都只有内参出现,目的条带一次都没有.我的目的条带全长2440bp,用taq plus没有做出来,后面换long taq也没有结果.然后在文献中看了可以先扩一个短
2015年02月15日发布人:www.1
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RT-PCR实验求助,急!
请教各位高手:
我需要从人的外周血中提取单个核细胞,抽提总RNA做RT-PCR检 测单核细胞表面某受体的mRNA表达水平,我拟用ficoll分离液,请教最少需多少血量?我想搜集一批标本后
2015年11月10日发布人:hold住
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[size=4][font=仿宋_GB2312][color=Black][求助]新手求助RT-PCR
我做了快2个月的PCR,可就是没有扩出来,急死人了,是植物病毒的一个基因,请教反转录后的cDNA质量用何种方法检测啊,谢谢
2011年10月22日发布人:ffaa
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[size=2]大家好!请问我做的是肝组织的RT-PCR,RNA提取跑电泳有两条明显的带(28S、18S),但是在PCR扩增后跑出的电泳条带模糊或者所需要的条带很明显,但他的下方有一团模糊,请问各位老师,这是什么原因,我该怎么办,谢谢
2016年01月07日发布人:伊莎贝拉
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[size=2]看到很多关于RT-PCR的求助贴,而且都是围绕那么几个问题。结合自己做RT-PCR的一些经验,先做个总结,不足之处请各位大虾补充。希望能够抛砖引玉,呵呵。
1.RT-PCR时,内参能出来而目的条带不出来的可能原因
2015年08月01日发布人:爱老虎游tt
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[size=2]1.我需要做RT-PCR,目的是半定量的差异比较,听说做半定量的比较循环扩增
在平台期前结束,请教如何确定RT-PCR的循环次数?多少个循环合适?
2. 还有一个傻问题我这的凝胶成像系统只能成像,但不能测定灰度值
2016年02月09日发布人:@STAR@
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好不容易把结果做出来了,但是在数据处理时把握给难住了。首先是不是很理解RT-PCR的结果中2-△△CT的数值类型该用何种统计方法进行计算。还请各位同仁给予指点RT-PCR数据结果如何进行计算。在下万分感谢。[/size
2015年08月03日发布人:bling
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,获得cDNA的几率大,适用于较长的cDNA链的合成。对于从细胞培养物中利用RT-PCR方法扩增mRNA丰度低的基因也很有效。但是AMV也有其自身的优点,酶的活性很高,扩增1kb以下的基
2016年04月08日发布人:PCR