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CLIP- Seq
SIRT7从紫外交联的HEK293T细胞中进行免疫沉淀,然后获取沉淀RNA进行测序,最后进行序列分析。敲除SIRT7会损害依赖U3 snoRNA的早期断裂步骤,而这一步对18sRNAde 生成是
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慢病毒转染稳转细胞系构建
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慢病毒包装
了载体3’端长末端重复序列(LTR)中的U3区增强子和启动子序列,这使得在逆转录过程中形成的子代载体5’LTR缺少增强子和启动子序列,因而即使在所有病毒蛋白都存在的情况下也不能转录RNA,一定程度
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Sequenom MassArray特异位点甲基化检测
Sequenom MassArray DNA甲基化采用专业的引物设计软件,无需进行PCR产物纯化,无需任何荧光标记,是研究几个到几百个甲基化位点的理想手段。
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逆转录病毒包装
病毒的核心蛋白;pol-编码逆转录酶;env-编码病毒的被膜糖蛋白。逆转录病毒的DNA插入宿主细胞染色体时,在5’LTR的U3左端和3’端LTR的U5右端各丢失2 bp,而在宿主染色体插入位点上生成4
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