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蛋白胶在质谱前的保存
胶水洗后用保鲜膜包装起来再置于4℃环境中保存,保存的时间不宜过久,避免胶条内的蛋白质发生降解,可以通过蛋白质条带是否发生扩散来初步判断蛋白质是否降解,发生降解的蛋白质胶条则不宜进行后续的质谱分析。除了
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Western Blot
3 min。 l 曝光:暗盒中铺一张保鲜膜,将PVDF膜去尽残液,贴在保鲜膜上,然后再覆盖一层保鲜膜。黑暗中放入X光胶片,压在包好的膜上。关上暗盒,开始计时,根据信号强弱适当调整曝光时间
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Western blot/免疫组化/microRNA
天内使用,4度保存,避免反复冻融。);撕下适当大小的一块儿保鲜膜铺 于实验台面上,四角用水浸湿以使保鲜膜保持平整;将抗体溶液加到保鲜膜上;从封闭液中取出膜,用滤纸吸去残留液后,将膜蛋白面朝下放于抗体
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有效靶点筛选
置于平铺好的保鲜膜上,以1:1的比例混合A液和B液,将混合液均匀滴加在PVDF膜上,避光反应3-5min。 ii. 将膜取出,稍微沥干多余的ECL底物反应液,放入暗盒,铺上保鲜膜(避免产生气泡),放上
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EMSA实验
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凝胶电泳迁移率(EMSA)实验服务案例介绍
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凝胶迁移或电泳迁移率实验EMSA
不能干燥。 m. 用保鲜膜将膜包好,不能有气泡。 n. 在暗室中,将膜放入曝光盒,用X-ray胶片压片,曝光时间随温度变化而不同,室温一般1 min。然后将胶片取出,经过显影,水洗
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凝胶迁移或电泳迁移率实验EMSA
不能干燥。 m. 用保鲜膜将膜包好,不能有气泡。 n. 在暗室中,将膜放入曝光盒,用X-ray胶片压片,曝光时间随温度变化而不同,室温一般1 min。然后将胶片取出,经过显影,水洗
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凝胶迁移或电泳迁移率实验EMSA
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Co-IP
。二、准备工作试剂:冷PBS,RIPA Buffer,细胞刮子(用保鲜膜包好后,埋冰下),离心机。RIPA Buffer配制: 基础成分:Tris-HCl(缓冲液成分,防止蛋白变性);NaCl
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