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收获时刚好长满
二、一开始就接种70%-80%,然后以3%或者5%血清,这样尽量不 让 细胞分裂增值,三天之后收获
试问,哪个更可行呢?
3、提总蛋白时有人先把细胞吹下来然后裂解,有人直接把裂解液加进板子,哪个更好些?可否提供两种方案
2012年05月15日发布人:huifeng0516
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[size=2][color=Black][b]
我在用RIPA裂解液提取肠上皮细胞蛋白,操作流程如下:
1、弃去六孔板中的培养基
2、用PBS冲洗三遍,最后一遍吸干净(PBS 4℃预冷)
3、裂解液200ul/孔,冰上
2012年03月10日发布人:+小生怕怕+
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[size=2][color=Black]各位战友,想问一下做westernblot之前,我裂解蛋白,蛋白裂解液加多少增么算啊,我查了资料有的说是按照细胞渣量加等体积的裂解液,有些又说是每50~100ul PCV 加入5 倍体积的蛋白裂解
2013年10月25日发布人:人小鬼大
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各位大侠,小的最近提了很多次贴壁细胞的蛋白,PBS洗后,吸净,25cm2的细胞加150~200μL,6孔板加100μL的碧云天RIPA(加入PMSF),冰上裂解
2013年06月19日发布人:jude
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请问6孔培养板每孔要加多少ml?[/b][/color][/size],[size=2][color=Black]一般加2ml。[/color][/size],[size=2
2012年08月29日发布人:JK.jon
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板里,用tip倒过来反复的磨[/color][/size],[size=2][color=Black]
我又一次 裂解液加少了,煮过之后就是胶状了哦。
还是要注意细胞的数量的[/color][/size],蛋白浓度太高了,增加裂解液的量,同时可以用超声碎裂器
2013年08月09日发布人:koook5695
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blot蛋白含量够不够,第一次接触这方面的实验,请有这方面经验的朋友多多指教,谢谢![/b][/color][/size],[color=Black][size=2]
六孔板中加入400微升裂解液太多,这样会使你得到的蛋白浓度过低,满足
2012年05月31日发布人:lagua123
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[size=2][color=Black]
我上个星期做好的蛋白裂解液,储存在-20度内,今天做电泳的时候发现里面有沉淀,不知道是为什么,对试验结果会不会有影响?望各位大侠赐教!Dead[/color][/size],[size=2
2014年07月07日发布人:98776langtao
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大家好!
我想问问:有谁用过碧云天的裂解液?要是提膜蛋白的话它推荐用RIPA(强)的裂解液。不知道它的效果怎样?里面还需要加其他的东西(比如蛋白酶抑制剂等)吗?是货到付款吗
2014年04月13日发布人:=pkchen=
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国外试剂公司网站提供的人、大鼠、小鼠各种组织、细胞的蛋白裂解液配方,我试过大鼠肾皮质的裂解液,很好用的,现拿出来和大家共享。需要提取蛋白的同学可以根据需要自己配制
2013年05月21日发布人:没良心55