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重点在于DNA的纯度,即减少或避免RNA、蛋白的污染很重要。因此在提取过程中需使用蛋白酶K及RNA酶以去除两者。
使用两者的细节:
1:蛋白酶K可以使用灭菌双蒸水配制成20mg/ml;
2:RNA酶必须要配制成不含DNA酶的RNA酶
2011年09月02日发布人:finger
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探针设计
四、试验操作流程
1、RNA提取
2、反转录
3、荧光定量PCR
一、miRNA简介
小 RNA是 19~28nt的调控RNA分子,主要包括微 RNA(micro RNA,miRNA)和小干涉RNA(short
2011年10月07日发布人:avi317
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对RT-PCR可谓是小菜一碟, 管你基因再复杂! 所以本人愿意与大家讨论. [/b][/font][/size][/color],RNA电泳出现4条带,请问最可能是什么?
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[size=4][font=新宋体][b]转帖:RT-
2014年04月23日发布人:荷塘青蛙!
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[size=4][color=Navy][font=楷体_GB2312][b]提RNA过程影响纯度和质量的关键是否在TRIZOL和氯仿这两步? [转载]
用TRIZOL作用20分钟后,转裂解液入EP管,加入1/5体积氯仿, 剧烈
2011年10月12日发布人:少林弟子
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[size=2]
今天提RNA,跑电泳后感觉28s,18s,5s都不错,28s和18s都挺亮的,但就是在28s上面还有一条清晰的条带,不知道什么原因,用rna酶处理后所有条带消失,证明应该不是DNA污染,请高手指点?[/size
2015年09月04日发布人:langlang
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][/size],[size=2][color=Black]我这几天一直在做RT-PCR,但是一直没有得到目的条带,检查了RNA的质量,还好,应该会有结果,引物也都正常,请高手指点一下啊![/color][/size],[size=2][color=Black]
最头
2013年09月30日发布人:雎鸠05
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[size=2][font=黑体]
我要在血清中提取RNA,请问用trizolk可以提取吗?如果可以用量是多少呢?[/font][/size],[size=2][font=黑体]
trizol是买好的,但是不知道该用多少量[/font
2015年09月04日发布人:小螺号
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[size=2]做realtime有段时间了,现在有几个疑问请教大家,
一般提取组织RNA后都会测量浓度,然后根据RNA浓度调整体积,使得进行转录的RNA总量一致,最后得到的cDNA就不再测浓度,直接加1ul进入25ul的
2015年06月03日发布人:中国特色
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与氯仿分层都不明显; 而只有1管分层明显; 提RNA结果分层不明显的管RNA比值都在1.3左右,而分层明显的管比值在2.0.这个对比说明什么问题呢?操作有什么技巧吗?提RNA的得率和纯度总是不稳定,有时高,有时低,而我们科室有个师姐每次提
2015年08月03日发布人:H2O
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[size=4][color=Black][font=宋体][b]请教:RNA提取和RT-PCR [转载]
我做了组织的RNA提取,过程很顺利,测OD值260nm/280nm=2.4,做RT-PCR,然后跑电泳,结果除了引物
2011年10月04日发布人:园丁##