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[size=2][color=Black][font=黑体]最近在做包涵体的复性与纯化,采用的是柱上复性的方法,可以得 到的蛋白沉淀了,请问柱上复性要注意些什么哟,出现沉淀后怎么办?[/font][/color][/size],[size
2013年06月08日发布人:youreyes
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我现在用Ni柱纯化his蛋白,想做柱上复性,遇到的问题如下。
收集各步洗涤的溶液,检测结果发现在蛋白加到柱子上以后就很多蛋白没有结合就流了下来,第一次洗涤溶液中蛋白量也不少,之后的几次
2013年06月08日发布人:hulu呼噜
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我也用镍柱纯化6His蛋白,遇到类似的问题,但我的情况不是完全不挂柱,上柱前和孵育后流穿的样品比较,蛋白还是少了的,但是——洗脱组分跑出来几乎没有蛋白条带,即使有淡淡的条带,也是杂带。这个问题很困
2013年05月18日发布人:红茶可乐
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都可以避免。,湿法装的比较均匀,气泡少,柱床和样品层被破坏的可能性也小,个人觉得干法比较适合粗分砍段。,在你装的很实的情况下,一般干法装柱的分离效果比湿法装柱的好。,湿法上柱会好一些,因为湿法上的比较好,没有气泡,湿法上柱麻烦,干法简单快捷
2010年09月19日发布人:ees人生无奈
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我的柱子每天刚平上柱压都很高,在160左右,因为用的是缓冲盐,需要过渡,过渡时柱压也不会有什么变化,换成缓冲液冲一阵会降下来一些,每天到进样时柱压会降到120多,请问是怎么回事呢?,刚平上柱是什么意思?
柱压变化跟温度有关,也跟流动相
2013年06月27日发布人:miglee
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我的蛋白上镍柱老是在柱子上聚集,很难洗脱,用1M咪唑和尿素才能洗脱下来。请问怎么才能不聚集呢?急,求助!
或是推荐些防止聚集的文献也行。多谢![/color][/size],[size=2
2014年01月25日发布人:yhz1973
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薄层摸完条件,再上柱,展开剂与流动相之间啥关系。怎么用展开剂的极性确定流动相的比例?,根据洗脱强度的计算公式算!,一般上柱的流动相极性要比薄层展开剂的极性小,柱子的分离效果要及时监测,根据监测结果及时调整流动相,洗脱剂的记性要比展开剂的
2010年07月03日发布人:fjdlgldg
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TLC和硅胶柱问题
在薄层上选择好的展开剂能不能直接用来洗脱硅胶柱?我看到有的帖子把在薄层上的展开剂急性降低一半后再上硅胶柱。。。,呵呵,薄层展开剂不行,极性太大了,就是要把Rf值压低。,如果分得很好也可以,一般同楼上要放低一定比例
2010年04月24日发布人:张汝君sandy
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硅胶柱,湿法装柱,然后干法上样,是不是直接把干粉洒在柱子上面,有没有什么注意事项?
上样过程中是不是要保持液面在样品之上?
我上完样,柱子就堵了。一般内径4cm的柱子,样品装多少厚呢?,湿法装柱,又干法上样,这恐怕不行,
上样
2011年04月07日发布人:maoguoqiang
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希望朋友能够奉献出自己关于天然药化如何上柱,柱分离,重结晶的私房经验和书籍。,一般都是去图书馆借
电子版看着费劲~
推荐中药提取与分离技术,现在有第二版了,挺不错的
华东理工 卢艳华主编,植物成分分析,也没有什么经验啦
就是按照
2010年07月23日发布人:njyyyil