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我有两段基因,分别是1700bp和500bp左右,我希望将两段基因通过中间的重叠互补区域连接,再以此为模板进行PCR,这个是不是就叫融合PCR啊??哪里能找到这样的资料呢??我 扩了好久都没有目的条带,反而有一非
2015年07月02日发布人:zhezhe
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我做的克隆表达目的片段与载体连接后酶切及PCR鉴定都是正确的,为什么表达量特别小呢,只见一条细线,大小应该是表达的融合蛋白,我优化过诱导时间,IPTG浓度,诱导温度但都无变化,我还换过几次载体
2013年07月20日发布人:bananapeople
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我做的克隆表达目的片段与载体连接后酶切及PCR鉴定都是正确的,为什么表达量特别小呢,只见一条细线,大小应该是表达的融合蛋白,我优化过诱导时间,IPTG浓度,诱导温度但都无变化,我还换过几次载体
2013年11月11日发布人:气泡
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为什么我在做细胞融合时,滴加完PEG,无血甭培养基终止后,会出现小的片状,碎渣子状的东西,是不是杂交瘤细胞与脾细胞破了?而且融合率都不高,大约20-30%,为什么?[/b
2012年02月24日发布人:wmp1234
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我第一次用lipofectamine2000,请问一下转染率大概是多少?我了解转染率与质粒 与质脂体的比例,细胞融合的百分数,转染时间有关系。但是我筛选的细胞株比较小,如果让细胞
2012年03月15日发布人:gemei0115
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[color=Black][size=2]大家好。最近我做GST融合蛋白,做了几次表达不出来。
我的目的蛋白36K。连接的重组体已经测序,测序结果没有问题,也已经融合上。 可是,30度,用IPTG1mM诱导4小时,从SDS-PAGE结果
2014年01月09日发布人:jrwyyplt
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不太好消化,我用了大概3.5-4分钟,发现传得细胞生长还可以,四天后进行进行了第二次传代,但是原代细胞长的很不好。是我消化时间过长,还是传代时间晚了?文献上说细胞长到70%融合时就可以传代,我传的时候细胞快铺满瓶底了,但是应该没到接触抑制的程度,这会有很大影响吗?[/b][/color][/size]
2012年06月26日发布人:伊莎贝拉
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[size=2][color=Black]我表达了一个麦芽糖融合蛋白,麦芽糖大约42KD,我的目的蛋白10KD左右,送质谱测序都测不到我的目的蛋白(我觉得可能是目的蛋白太小的原因吧),明年初就要答辩了,时间比较急,不知道我要如何鉴定我的
2014年02月07日发布人:memory
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洗脱产物(目的融合蛋白,未酶切)
右边酶切4道=不同酶切时间的产物(固相酶,所以酶切产物里理论上只有GST融合头+目的蛋白) [/color][/size],[size=2][color=Black]
酶切后的产物(理论上只有GST融合头
2013年11月10日发布人:abc816
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构建了两个融合蛋白表达载体。转染细胞后发现荧光表达上存在有差异,是不是有蛋白定位有关?如果要进一步确定是要做共聚焦显微镜或者其他的吗?[/b][/color][/size
2012年04月06日发布人:彼岸花opp