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武汉巴菲尔生物-免疫荧光检测
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免疫组化
分钟,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。4) 5~10%正常山羊血清(PBS稀释)封闭,室温孵育10分钟。倾去血清,勿洗,滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。5
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免疫组化
10 min阻断内源性过氧化物酶的活性, PBS冲洗三次,每次3 min ;④5~10%正常山羊血清(PBS稀释)封闭.室温孵育10 min ,吸去血清后滴加稀释至适当比例的一抗。37*C孵育1-2
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冰冻切片免疫组化
室温孵育10 min阻断内源性过氧化物酶的活性,PBS冲洗三次,每次3 min;④5~10%正常山羊血清(PBS稀释)封闭,室温孵育10 min,吸去血清后滴加稀释至适当比例的一抗,37℃孵育1-2
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免疫荧光(石蜡-三标
(不透膜也没关系,反正细胞早就被切开了)。但注意细胞膜表面的整合蛋白不能加tritonX-100,否则会被洗掉。10. PBS洗3min×2次。三、免疫标记11. 甩干PBS,正常山羊血清在湿盒中37
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石蜡切片
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组织切片
。5.**荧光染色:冰冻切片室温晾干15min,可用含10%正常山羊血清的PBS室温封闭切片1 小时(此步可不洗)滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液(抗体的量视组织大小而定,原则是可以均匀覆盖组织面
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