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酵母蛋白表达系统
啤酒酵母。 3.PCR鉴定转化子,选择阳性转化子进行蛋白表达鉴定。 4.可以依据客户的要求,增加多拷贝转化子的筛选以及蛋白表达优化两项服务内容。 5.根据客户要求纯化重组蛋白。 6.小试通常指从
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shRNA载体构建
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过表达miRNA构建
切后回收线性化的载体片段。目的基因片段与线性化的载体片段经同源重组后转化E.coli感受态细胞。用菌落PCR鉴定转化子,阳性克隆送测序。测序无误的克隆进行质粒抽提。 1. 引物设计: 从GenBank
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封闭miRNA构建
感受态细胞。用菌落PCR鉴定转化子,阳性克隆送测序。测序无误的克隆进行质粒抽提。实验步骤如下: 1. TuD RNA的化学合成: 从miRBase中查询到hsa-mir-21的序列,并设计其TuD
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酵母蛋白表达验证型套餐
质粒转化到酵母宿主菌,如毕赤酵母或啤酒酵母。 3、PCR鉴定转化子,选择阳性转化子进行蛋白表达鉴定。 4、可以依据客户的要求,增加多拷贝转化子的筛选以及蛋白表达优化两项服务内容。 5、根据客户要求纯化
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酵母蛋白表达经济型套餐
(如pPICZaA 、pGAPZaA等)或胞内表达(如pPICZA 、pPIC3.5K等)。 2、将构建好的质粒转化到酵母宿主菌,如毕赤酵母或啤酒酵母。 3、PCR鉴定转化子,选择阳性转化子进行蛋白
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酵母蛋白表达标准型套餐
酵母或啤酒酵母。 3、PCR鉴定转化子,选择阳性转化子进行蛋白表达鉴定。 4、可以依据客户的要求,增加多拷贝转化子的筛选以及蛋白表达优化两项服务内容。 5、根据客户要求纯化重组蛋白。 客户需提供必要的
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毕赤酵母系统蛋白表达项目合作
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过表达载体构建
的制备和转化,详见《精编分子生物学实验指南》¬。¬ 7. 菌落PCR鉴定阳性转化子: 挑取平板上长出的转化子重悬于10µl LB培养液中,取1µl作为模板进行菌落PCR鉴定。反应体系和PCR循环条件
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亚克隆(表达载体构建
亚克隆(表达载体构建) 基因克隆是把外源基因与目的载体进行体外连接,继而转化大肠杆菌,筛选出含有目的基因重组质粒的转化子,并将该转化子大量扩增提取重组质粒的过程。 ² 服务
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