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细胞划痕实验服务
1) 铺板:处于对数生长期的细胞,胰蛋白酶消化成单细胞悬液,接种于6孔培养板;细胞铺板6*105个细胞/孔,确保第二天细胞能够长满,每孔最终的培养基总量2mL;
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稳定转染(质粒转染
2.2.1常规细胞服务流程:1.杀伤曲线绘制;2.转染质粒,铺板,用不同抗生素浓度筛选细胞单克隆;3.qPCR和WB检测稳定克隆的外源基因表达水平
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稳定转染
2.2.1常规细胞服务流程:1.杀伤曲线绘制;2.转染质粒,铺板,用不同抗生素浓度筛选细胞单克隆;3.qPCR和WB检测稳定克隆的外源基因表达水平
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qpcr或Western Blot检测稳定克隆的外源基因表达水平
转染物。实验流程:1)常规细胞:a. 杀伤曲线绘制;b. 转染质粒,铺板,用不同的抗生素浓度筛选细胞单克隆;c. qPCR或Western Blot检测稳定克隆的外源基因表达水平。2)特殊细胞:a.
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稳定转染
细胞服务流程: 1.杀伤曲线绘制;2.转染质粒,铺板,用不同抗生素浓度筛选细胞单克隆;3.qPCR和WB检测稳定克隆的外源基因表达水平。2 特殊细胞(质粒转染)服务流程: 1.根据细胞特点、实验特点或
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细胞克隆
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稳定转染
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细胞增殖与毒性检测(MTT法
,细胞活性越强(如果是测药物毒性,则表示药物毒性越小)。实验步骤1:收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100u1,铺板使待则细胞调密度1000-10000孔,(边缘孔用无菌PBS填充)。2:5
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CCK8检测细胞增殖/毒性
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稳转细胞株构建
相应的药物对靶细胞进行筛选,从而得到稳定表达外源基因的细胞克隆。 稳转细胞株构建实验步骤1.筛选浓度测定:前一天细胞全部死亡的抗生素浓度作为筛选浓度2.细胞接种:转染实验前一天接种细胞(铺板密度依细胞
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