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DNA都注入到大肠杆菌里面,所以上清液放射性很低,底部的沉淀物放射性很高,而且在新合成的子代噬菌体中检测到32磷!2、同理,当噬菌体的蛋白质用35硫标记后,只是停留在大肠杆菌表面,离心后直接脱落下来,悬浮在上清液中,所以检测到上清液的放射性
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上清液出现少量放射性、沉淀物出现少量放射性.用32P标记实验时,上清液出现少量放射性,是因为:保温时间过长,噬菌体在大肠杆菌体内增殖后释放子代,经离心后也会分布在上清液中,会使上清液放射性含量升高;用35S标记实验时,沉淀物出现少量放射性,是因为:搅拌不充分,有少量噬菌体的蛋白质外壳吸附在大肠杆菌表面,随大肠杆菌离心到沉淀物中,使沉淀物中出现少量的放射性
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定时或定量逐管收集色谱洗脱液,并用γ计数仪测定每管的放射性强度。通常最先洗脱出的为聚合物杂质放射峰,然后为含标记物的主放射峰,随后即为游离125I-峰。(2)鉴定放射化学纯度指单位标记物中,结合于被标记物上的放射性占总放射性的百分率,一般
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物理、化学或生物的方法去除或降低放射性污染的过程,该过程实际上只是改变了放射性核素的存在形式和位置。去污的效果可用去污因子K或去污率β表示:式中,A前和A后分别为去污前后污染物的放射性活度值。多种去污方法联用时,总去污因子是各单种方法去污因子
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核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。
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放射性标记化合物的常用标记方法有化学合成法、同位素交换法和 生物化学法。通常是根据所需标记化合物的组成、结构及应用要求来选择合适的放射性核素,然后再根据可提供的含有所需放射性核素的原料,结合应用要求来设计其标记路线。原料的物理化学性质不同
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广泛,可根据需要合成相应的序列,可合成仅有几十个 bp 的探针序列,对于检测点突变和小段碱基的缺失或插入尤为适用。核酸探针按标记物划分可分为放射性标记探针和非放射性标记探针两大类。放射性标记探针用放射性同位素作为标记物。放射性同位素是最早
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放射性示踪物(英文名称radioactive tracer),又称放射性示踪剂或指示剂。是一种化合物,该化合物的一个或者多个原子被放射性同位素所替代。从而,通过放射反应,该化合物可被探测识别。
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精度高,稳定性好,能满足临床应用要求。 免疫荧光分析技术是新发展起来的精密的免疫标记检测技术,与传统的酶联免疫法及金标法相比,免疫荧光分析技术灵敏度高,特异性强,操作方便,不用放射性物质作为标记物,因此具有无放射性、标记物稳定、便于长期保存
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核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。下面将介绍各种类型的探针及标记方法。