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求大神指导!
我要做的是讲质粒进行定点突变,质粒大小为4800 bp,一共用了两对引物进行pcr。酶是NEB的Q5高保真聚合酶,变性温度是98℃,退火温度是53℃,条件都是按照酶的试剂盒上的条件来的。但没有P出来
2014年09月21日发布人:bring
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46XX性发育睾丸疾病
各位兄弟姐妹,俺是第一次做定点突变,以下是我的目的序列,蓝色字体的是我的目的序列,也就是我要扩增的序列,从181到2475;红色标记的碱基AAC,AAT,我都想突变为CAG,请
2015年07月02日发布人:fox_79
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[size=2]谁用过GB-Mut定向突变试剂盒做定点突变?
我最近做是都没有变回来。我的基因长3kb,质粒4kb,共7kb,有一个点突变,设计引物按要求来的,可是没有变回来。求解[/size],[size=2]
不好意思,没太看懂
2015年03月10日发布人:prettygirl@
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体外定点突变技术是研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系的有力工具,也是我们在实验室中改造/优化基因常用的手段。而采用重叠引物PCR介导的定点突变实验是一种快速有效的在基因中特定位点引入特定突变的有效技术。该技术采用具有互补末端的引物,使
2009年10月11日发布人:黄老邪
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[size=2][font=Impact][color=Black]目的:1.DNA甲基化处理,2.甲基化特异PCR
已试方法:
利用chemicon 公司的CpGenome™ DNA Modification Kit 进行甲基化
2016年04月08日发布人:阿福
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[size=2]定点突变一个8k以上的质粒,做了2次都不成功,后来点检测pcr产物,没有条带(我用的Phusion酶,延伸6min)。是不是buffer,dNTP,酶的浓度都要加大?延伸时间应该多久?求大神指导。[/size],[size
2014年10月28日发布人:idea2011
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本人要做抗凝血DNA的提取(EDTA抗凝),但是我想问一下可以库存后再做么?可以在-20度放多久?需要特殊处理么?有无实验步骤发来?谢谢![/size],[size=2]
可以库存的。最好在-80度。
一般不需要
2015年08月31日发布人:memory
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[size=4][color=Black]提取组织样品中的病毒DNA [转载]
今天一天都没吃肉,主要因为上午做了4个组织样品的核酸提取前处理.
差点晕死了,样品是在-20度冰箱里保存的前年的可疑组织病料,刚拿出来还好,一会儿
2011年09月24日发布人:mod=8048
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[size=4][color=Purple][font=楷体_GB2312][b]求助“关于石蜡组织DNA的提取” [转载]
我现在正做着从石蜡包埋组织中提取DNA的实验,但是我用粗提的DNA做PCR一直没有成功,本想是不是
2011年09月20日发布人:紫圃
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都知道DNA甲基化能抑制基因表达,但是为什么?,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。
比如:甲基化会促使异染色质化,DNA构象改变(如Z型-B型之间的
2013年12月20日发布人:ssonglikihi