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我做的RT-PCR溶解曲线双峰老是有双峰,做了很多次了,在63-65℃出现,是引物二聚体吗,引物二聚体是不是一般在70-80℃出现呢,我用的是TAKara的sybregreen试剂盒,逆转录也用的是Takara的,感觉
2015年11月11日发布人:9900
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[size=2]如图所示,SYBR Q-PCR溶解曲线双峰,不知什么原因,好多次了都是这样,不知什么原因,结果不知可靠否?求解,谢谢了![/size],[size=2]建议用电泳检测一下定量PCR产物,因为你的产物峰看上去不是很Sharp
2015年10月09日发布人:西子
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[size=2][b]荧光定量PCR溶解曲线Tm跨度宽是怎么回事,谢谢大家[/b][/size],[size=3]
染料法?[/size],[quote]原帖由 [i]feima+[/i] 于 2014-11-29 14:30 发表
2014年11月29日发布人:misswu61
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大家看下溶解曲线,帮忙分析下,先谢了!
第1张是一个基因PCR的Raw的溶解曲线,第2张是其Derivative的溶解曲线,第3张是另一个基因PCR的Raw的溶解曲线,第4张是其Derivative的溶解曲线,第5张是Realtime的条件
2016年04月08日发布人:tuuu2
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[size=2]刚开始做Real time PCR,做了几次,每次都是只有溶解曲线,而没有扩增曲线?大家能告诉我原因吗?[/size],[size=2]
相关疾病:
先天性卵巢发育不全综合征
你是不是在扩增的时候没有读板?把你的反应
2015年10月09日发布人:fox_79
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rt-pcr中溶解曲线是干什么的,是如何测量出来的?说详细点,谢谢![/size],[size=2]
融解曲线是用来验证扩增产物特异性的,如果产物是单一条带,融解曲线就会出现一尖峰;如果有引物二聚体或其它非特异性扩增
2015年06月03日发布人:shkudo
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有点成就感了,三就是希望版主给我加点分数了。呵呵。好了,现在开始吧。
1. ABI7000的仪器如何做溶解曲线:我们单位刚开始的时候只有一台仪器ABI7000,其他人都是用taqman探针做的,而且只是对结果进行定性分析。我用的是SYBR green 染料,是需要做溶解曲线的,关于设置的问题就来了,设置好PCR的程序以后,在程序下方有一个框框,具体我忘了,把
2011年08月20日发布人:果冻也酸
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sybr看引物在一起是否能产生特异性的产物.荧光定量PCR后跑电泳检测,现在发现有问题了,大家可以看荧光定量PCR扩增图中绿色的溶解曲线,一个在Tm为80左右的小峰对应的是电泳图上稍大一些的目的产物,而在Tm为86左右的的大峰对应的是电泳图
2011年08月13日发布人:七彩星星
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各位大侠请帮忙看一下
我用SYBR Green法做相对定量PCR检测两个目的基因得表达,但是用ABI7500两步法扩增得到得溶解曲线都有双峰,并且将退火延伸温度从60度提高到65度重新跑后,溶解曲线双峰仍然没有消掉
2019年12月26日发布人:fox_79
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[size=5][font=新宋体][b]RT-PCR讨论区 [转载]
大家做RT-PCR的比较多,我认为有必要建立一个专区,这样大家能在这里有目的地交流。现搜集了一些帖子,供大家学习参考,更欢迎同胞们踊跃提问,积极发言~希望
2014年04月23日发布人:荷塘青蛙!