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],[size=4][color=Purple]你的内对照β-actin都没有出现PCR产物。可见你以前每个环节包括RNA抽提,RT,PCR都有可能有问题。
我的建议是:
1.所有要用的器具都严格用0.1%DEPC处理.
2.从RNA抽提,到RT,到PCR要一路做下来,别停,甚至可以不用测CD,更何况
2011年10月04日发布人:园丁##
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你的RNA跑一个电泳,看有没带出现。[/size],[size=2]
你的内对照β-actin都没有出现PCR产物。可见你以前每个环节包括RNA抽提,RT,PCR都有可能有问题。
我的建议是:
1.所有要用的器具都严格用0.1
2015年12月01日发布人:yonger
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[size=4][color=Blue][size=4][font=黑体][求助]RNA抽提为何是很白的产物!
大家好!
我最近做RT-PCR ,使用的是C6细胞株,但是收集细胞TRIZOL裂解后,提取RNA ,所得产物是
2011年10月19日发布人:泡泡
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脂肪组织中抽提RNA前也查了一些文献,看到zhongzidegushi说的那条信息,咨询Trizol产品公司,建议用柱式RNA进行抽提,但考虑到麻烦,于是进行了一下尝试,用普通的Trizol进行抽提,并进行RT-PCR,最后电泳,结果很好,条带
2011年10月22日发布人:lgm
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[size=2]
小弟刚入手荧光定量PCR,原理不是怎么清楚,糊里糊涂就做上去了.取的动物全血,200微升左右抽提,使用的是invitrogen的trzol.RNA抽提完没有DNA酶消化,直接RT,然后real time PCR检测基因
2015年12月04日发布人:bring
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去上清,细胞冻存于-20度,如果时间长才用就冻入-70度[/color][/size],[size=2][color=Black]
如果你要分别取细胞抽提RNA和蛋白,那么抽RNA用的细胞用TRIZOL裂解后-80度储存,但最好不要超过
2012年09月09日发布人:知了知了
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[size=2]请问RNA抽提后存放在-80度冰箱中至少可以存放多久?
还有RT-PCR中引物如果是灭菌水,而不是DEPC水配置,RT一定失败吗?[/size],[size=2]
可以放1年左右
应该用DEPC水溶,灭菌水效果肯定
2016年04月08日发布人:土坷垃
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[size=4][color=Black][求助]菜鸟提问:细胞抽提RNA
培养板上的细胞进行抽提,加入异丙醇离心后沉淀肉眼一点都看不出来,弃上清时分寸难以把握,感觉吸干上清后什么都没留下了。
是不是我细胞太少的缘故
2011年10月10日发布人:wiwi
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[size=4][color=Black][font=黑体][求助]RNA抽提其它问题迫切求教
因本人是我校第一个做PCR的学生,新仪器老师也没用过,基本靠自己自学,因此有很多问题不懂,摸索了几个月特痛苦,昨天才发现丁香园
2011年10月22日发布人:INK
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只有少数几个,而后续工作,如RT,或者其他,均已准备好,你抽一个做一个也无妨,但是从你的情况推测,你目前只是在收集标本,所以建议:采血后立即用液氮冷冻,然后可以在-70度冻存,直到你开始抽提RNA,这样不会影响RNA质量,当然,如果你采的
2011年09月20日发布人:丁香@@