-
重点在于DNA的纯度,即减少或避免RNA、蛋白的污染很重要。因此在提取过程中需使用蛋白酶K及RNA酶以去除两者。
使用两者的细节:
1:蛋白酶K可以使用灭菌双蒸水配制成20mg/ml;
2:RNA酶必须要配制成不含DNA酶的RNA酶
2011年09月02日发布人:finger
-
接着往下面做啊
我已经提了6次了。真的不想做了[/color][/font][/size],[size=4][color=DarkRed][font=黑体]还有,我不是用变性电泳跑的,就是将电泳槽啊,什么东西都用3%的过氧化氢泡,再用无RNA酶
2011年10月10日发布人:qqq111
-
[size=2]
今天提RNA,跑电泳后感觉28s,18s,5s都不错,28s和18s都挺亮的,但就是在28s上面还有一条清晰的条带,不知道什么原因,用rna酶处理后所有条带消失,证明应该不是DNA污染,请高手指点?[/size
2015年09月04日发布人:langlang
-
~1.0mlTRIZol,裂解4~5min后将其移入无RNA酶的EP管中,-80度保存;或者是先常规的将细胞消化下来,PBS洗2~3遍,加TRAZol裂解。[/size],[size=2]谢谢大家!可以不用消化下贴壁细胞直接裂解吗?能充分裂解吗
2015年08月03日发布人:yonger
-
,-20度放置5-15分钟
离心去上清,加5MLPBS,细胞补水15分钟
离心去上清,加1ML DNA staining solution 室温避光孵育30分钟,送流式
染液保存在4度冰箱,不知里面是否含RNA酶,含RNA酶可放于4度吗
2012年04月17日发布人:mamamiya
-
请教高手推荐一下)
耗材
EP管(1.5ml,0.2ml)
枪头(1000ul, 200ul, 10ul)(为省事可以买无RNA酶优质枪头,当然为节约也可以用DEPC泡,本人比较懒没泡过)
八连管 [/font][/color][/size],[size=4][color=Blue][font=仿宋_GB2312]补充一下
2011年10月16日发布人:研究僧112
-
为什么总是提他们?因为还是很佩服的哦,生怕自己说错了,被他们指出来哦)都谈到了很多,鄙人也充大头答了一些问题,但是还是有各种问题,由于的基因表达还有点实战经验(但也技止此而),所以想些点东西给大家参考,计划把包括RNA酶保护分析
2011年08月12日发布人:王六六
-
容易激活RNA酶。你可以在取得标本时立即用消毒的剪刀把标本剪成大约50mg的小块,提取RNA时在液氮里研磨,然后迅速倒进有裂解液的匀浆器中。其实我经常不匀浆,用枪吹打,再用一次性10ml注射器吹打,一样可以。具体的方法你可以参考《分子克隆》 [/size],[size=4]问题出在“室温下解冻标本,剪取50mg",这一步一定
2011年09月21日发布人:爆炸头
-
普通的胶跑RNA检测一下质量是完全可以的。跑不出漂亮的图,两方面的原因:
1.本身RNA提的质量就不高
2.电泳时,最好使用新胶,新的电泳缓冲液(我曾经用过旧的胶,结果本来效果很好的RNA在跑的时候就降解了,RNA酶污染的太厉害
2011年10月21日发布人:小妖儿
-
,检验一下RNA有没有提出.
今天刚跑完一个,第一次,只看到了泳道,没有带
请各位大侠帮忙解释一下,是何原因?
因为我在制胶和配缓冲液时所用的液体都没有进行灭RNA酶处理,
这会不会影响结果,比如把RNA 分解了?还有琼脂糖的浓度有
2011年09月19日发布人:WHO?