-
到EP管中。
2.加200ml氯仿,震荡30s,放置3min。
3.离心15min,10000rpm。
4.取上清加入等体积异丙醇。
5.离心10min,11000rpm
6.倒掉EP管中液体,加入75%乙醇。
7.离心5min
2023年02月24日发布人:yysr238
-
=0.8左右,分成两管,其中一管加入终浓度为1mM的IPTG,于37度下,250rpm诱导4个小时,另一管作为对照。
时间到后,各取1mL菌液,12000rpm离心,加入400uL 1%的SDS将菌液悬浮,在100度下沸水浴10min,再
2014年03月01日发布人:docsy
-
[size=2][color=Black][font=黑体]
从25cm2细胞瓶中提取步骤:
1、PBS洗2次。
2、胰酶消化细胞,加4度培养液5ml中止反应。
3、3000rpm 离心5min(4度),去上清。
4、加入裂解液
2013年06月08日发布人:fox_79
-
][color=Black]一、证明目的蛋白有表达
1、挑取一单菌落接种于含氨苄(Amp,终浓度为100g/mL)的3mL液体LB培养基中37℃,250rpm培养过夜。
2、将过夜培养菌液以1:100转接于含上述抗生素的100mL液体LB中
2013年06月01日发布人:箭头儿
-
1000rpm离心5min,吸除冻存液,加入1ml无血清培养液,轻柔吹打形成悬液。
3. 1000rpm离心5min,吸除培养液,加入1ml含血清培养液,轻柔吹打形成悬液,移入25cm2培养瓶中,加含血清培养液到5ml。
4. 37℃,5%CO2
2012年10月14日发布人:DNA
-
,重复3-5次.
(2)离心机 1000rpm,4℃ 离心 10min 后,所得上清液转入超速离心管。(去掉大块组织及结缔组织)
(3)100000g,4℃ 离心 1hr, 弃去上清.(此为胞浆蛋白,若只提取胞浆蛋白,可用10000rpm, 4度, 30分钟离心,取上清即可 )。沉淀用适量的 Buffer B重悬,4度过夜后,分装至 EP管,Eppend
2013年11月08日发布人:applebook=213
-
=Black]
离心时间短一点即可去出部分死细胞,试试看.[/color][/size],[color=Black][size=2]
转速低一点,e.g. 800rpm[/size][/color],[color=Black][size
2012年10月08日发布人:zsxan1990
-
感受态细胞加入到5ml的LB中,37度,180rpm培养90分钟左右至OD0.5,然后4度3000rpm离心10min,弃上清,加入5ml预冷的0.1M CaCl2重悬,冰上静置30min,4度3000rpm离心10min,弃上清,加入400微升
2013年12月19日发布人:taoshengyijiu
-
什么速度呢?我用的是8000rpm(7150g),但是还是有很多杂质难以完全分开,但是我看到很多战友仅用4000rpm,请问这具体是多少g呢?总体积是多少,效果如何?离心后洗涤2次足够么?
还有就是有几次入瓶培养后,当天晚上可见细胞
2012年02月11日发布人:00无名指00
-
振摇30秒,静置15分钟后,准备上离心机12,000 RPM之前,观察各EP管TRIZOL与氯仿分层情况, 发现很多管TRIZOL 与氯仿分层都不明显; 而只有1管分层明显; 提RNA结果分层不明显的管RNA比值都在1.3左右,而分层明显的
2011年10月12日发布人:少林弟子