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了。[/color][/size],[size=2][color=Black]
样品一般会有什么问题呢?
是上样量过大么?
因为是显内源的蛋白,所以上了30ug
按理来说,这个上样量不算大呀
我用的是BIO-RAD的电泳仪,
2014年06月20日发布人:JK.jon
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做western blot 近一年,在要发文章的时候发现条带不够漂亮,高表达蛋白有时是哑铃状,有时是笑脸状,做内源性蛋白时同一蛋白会出现条带不在同一水平线上,或者同一条带只显影一部分或者不同
2013年05月18日发布人:短头发
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我做WB快3个月了,内参能做出来,暗室下能看到很明显的荧光条带,但是目标蛋白一直没从出现过影子,该怎么办?
我的目标蛋白54KD,内参是actin,做的是组织内源性蛋白.考
2014年03月10日发布人:koook5695
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样品易受到内源性的L-LDH和D-LDH的干扰,因为NAD+是这两个酶的共同底物。为了避免非特异的NAD+转化成NADH而导致D-乳酸盐浓度的高估,对粪便样品进行前处理非常必要。查文献说,用高氯酸脱蛋白,用量与样品体积比为1:1。
存在
2010年07月02日发布人:shzyxq
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真核过表达的蛋白 还可以检测内源性蛋白
原核过表达的蛋白 和 真核过表达的蛋白 在aa的一级结构上是完全一致的,虽然在二级结构 三级结构 上不一样,但是在经 SDS-PAGE后 应该是线性化了 也就是一级结构完全一致,不存在二级结构和
2013年12月25日发布人:101010
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爆发也能p出好看的条带,想不出操作哪里不一样,
用的是sigma的flag的珠子,课题中涉及co-ip很多,平均一个ip实验用一支珠子,耗费的除了钱以外还有我宝贵的时间和心血。
最近p内源性的,A,B蛋白的抗体,以及珠子都是santa的
2013年11月15日发布人:milkdog
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人品爆发也能p出好看的条带,想不出操作哪里不一样,
用的是sigma的flag的珠子,课题中涉及co-ip很多,平均一个ip实验用一支珠子,耗费的除了钱以外还有我宝贵的时间和心血。
最近p内源性的,A,B蛋白的抗体,以及珠子都是
2013年07月26日发布人:daod
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传代之后短期内需要把死细胞去除吗?[/color][/size],[size=2][color=Black]
传代之后将死细胞去除有助于活细胞的贴壁及生长,因为细胞死亡后释放出来的内源性毒性物质 如蛋白酶等将影响正常细胞的生长。当然
2012年07月22日发布人:avi317
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样品易受到内源性的L-LDH和D-LDH的干扰,因为NAD+是这两个酶的共同底物。为了避免非特异的NAD+转化成NADH而导致D-乳酸盐浓度的高估,对粪便样品进行前处理非常必要。查文献说,用高氯酸脱蛋白,用量与样品体积比为1:1。存在疑问:用
2016年05月01日发布人:iop
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[size=2][color=Black][b]我做过不少磷酸化蛋白的Western blot,之前在免疫学技术讨论版发过贴子:
[url]http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=68&id
2013年05月06日发布人:箭头儿