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二十世纪七十年代初期H.Ghobind Khorana和他的同事就提出了用PCR技术以减少基因的化学合成中的工作量的想法。然而由于当时技术条件的限制,基因测序、引物合成等方面的研究都存在一定的局限性,特别是还没有发现稳定的耐热DNA聚合酶(thermostable DNA polymerase)等诸多因素,使得Kh
2011年08月30日发布人:荷塘青蛙!
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[color=Black][size=4][font=楷体_GB2312][b]针对外显子设计PCR测序引物教程[转自 丁香园论坛]
在园子搜索后,没有看到长基因(大与1000base)最简洁方法,而我现在欧洲实验室里从事这方
2011年08月20日发布人:蓝蜗牛
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为什么测序时目的基因片段出现碱基丢失啊 最多的一个少了有10几个碱基 我的cdna模板应该没问题的,请教这是什么原因?要从哪些方面考虑 谢谢啊
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一般丢失掉是在那
2014年07月30日发布人:sunbent
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基因为1800多bp,最初是克隆到表达载体pPIC9K中,转化毕赤酵母GS115,提转化子的基因组DNA,经测序基因和读码框都正确,诱导发酵后跑SDS-PAGE,改变诱导条件后重复多次还是没有
2014年05月28日发布人:lagua123
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谢晓亮课题组实现了对单个细胞全基因组的高精度测序,随后该技术被应用到多项研究中。数据显示,我国每年约有20万不孕不育夫妇需要辅助生殖技术的帮助,但抱婴率并不理想。体外受精技术(IVF)是辅助生命个体在体外从单个细胞开始发育的技术,因此单个
2013年12月30日发布人:12xunmei
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我的一个凝集素基因测序正确,诱导后有大量表达,用活性和变型的方法挂Ni柱,均纯化不出来,而同样的试剂和柱子别人能纯化出来,真不知道是什么原因,郁闷死了.[/color][/size
2013年12月28日发布人:langlang
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[size=2][color=Black][font=黑体]大家好,最近构建表达鱼生长激素,克隆到pET-22b(+)中转化大肠bl21,基因测序正确,IPTG诱导后出现特异性带,理论分子量是23kd,但是sds-page和质谱分析都是
2014年06月09日发布人:lixi559
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[size=4][color=Black][font=仿宋_GB2312][b][请教]有关测序的一个问题
我正在做一个先天性疾病的基因测序,假如这个基因是杂合的,一个染色体上的基因是发生突变的,其等位基因是正常的,我把其
2011年10月06日发布人:爬呀爬
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,但是有一条带貌似是要找的。不知切胶做N端测序可不可以?引物如何设计呢?
还望请大牛们指点。谢谢了,你的是重组酶还是野生酶?,野生酶。目前只有5个报道,找到的4个基因根本没有同源性。。。。。。。,1、 你的菌既然没有全基因测序
2015年10月14日发布人:mimima
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如果有很多不同DNA小片段的混合物,大概500-1000bp之间,而且都是未知的,也就不能像一般基因测序一样提供引物。请问这种情况能否用高通量测序仪测出这些DNA片段的序列。,是否可以对这些混合的DNA片段一起末端加A,然后连接T载,再用
2015年10月25日发布人:qinqinai