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[size=2][color=Black]蛋白分子量82KD。转膜条件为400mA70分钟。转膜后封闭时间为室温3小时,封闭液来自碧云天公司。一抗santa公司产品,稀释度1:800,室温孵育2小时;二抗为博士德公司产品,稀释度1
2014年04月26日发布人:xyw5
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以往做western的时候,一抗都是37°孵育二小时,不过日前觉得抗体结合似乎不是很好,一抗比例已经提高到1:200了,考虑了一下想增加孵育的时间。
尝试了一下孵育三小时,但是结果条带同样
2014年06月18日发布人:zhihui小新
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[size=2][color=Black][b]请教大家western抗体孵育用什么东西或者容器比较方便、节省抗体,
我看有人用密封袋,也有人用一种长方体玻璃容器,大小与膜匹配,
如果没有其他更好的方法,想请教这种东西在哪里能
2013年05月11日发布人:woshituzhu
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向各位战友请教一下,我现在做WB ,内参是GAPDH,40KDa,目的蛋白是200KDa左右的,各自的一抗和二抗均不同,试问能否可以一起孵育,会不会有交叉反应而影响结果?还有就是我目的蛋白最后
2014年03月17日发布人:89tongzijun
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想问下,一抗孵育一般都用什么方法好呢?
用平皿放摇床孵育效果好还是反贴法好?
还有就是用反贴法时要放摇床摇吗?[/color][/size],[size=2][color=Black]没做
2014年04月01日发布人:docsy
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TBS洗膜,3次,10分钟/次,加二抗,二抗用TBS稀释,37度孵育1小时,用TBS洗膜,3次,10分钟/次,显影,定影,结果没有任何条带,感觉步骤没有问题,就是不出带,是不是一抗孵育不上的原因吗?谢谢大家.[/font][/color
2013年10月09日发布人:ilovegaga
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请问各位高手,我能在一张膜上同时孵育两种抗体吗?因为我的目的蛋白和内参相差不是很远,做了好多次都没有好结果,我在想是不是切胶时没有切好,所以我想试一下不切胶,整块转膜,然后同时孵育抗体。请问
2013年07月24日发布人:vvmmoy
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Q1可不可以分次孵育不同的一抗?
Q2抗体能不能分装?因为我怕多次冻融抗体失活,但是我老板说量太少了不要分装。那分不分好呢?
Q3加了一抗的牛奶能冰冻保存吗?我想
2013年06月05日发布人:zhezhe
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四度过夜[/font][/color][/size],[size=2][color=Black]
请问孵育一抗是在摇床里摇比较好,还是就静置在腊皿里呢,这2种方法有没有差别呢
2013年10月07日发布人:969
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请教高手高高手,
抗体到底是在室温下孵育好还是4度过夜好?
是在摇床上摇好还是平铺静置好?
我曾经听说,考虑到抗体是活性物质,所以孵育温度要高一点。但是分子克隆上又说要4度孵育
如果
2014年04月15日发布人:tuuu2