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我根据基因间重复序列设计引物,对大肠杆菌基因组进行扩增,前几天都扩出来,可这几天用同样的条件,相同的体系括了好几次都没扩出来,不知道什么原因,哪位高人能帮忙分析一下可能是什么原因。pcr体系:50微升体系,Taq
2015年08月05日发布人:IAM007
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[size=2][font=黑体][b]上周二抽的RNA,纯度1.98,模板稀释到100微升的。
做touchdown,
一扩: 模板2 LAtaq 0.1 buffer2 dNTP0.7 引物各3,20微升体系
二扩
2014年09月24日发布人:04906
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[size=2]本人3’端已经测出来了,现在做5‘端,却怎么也扩不出来。5'RACE做了两轮pcr,用的都是以下程序:即1、94度2分钟。2、94度30秒,72度3分钟,5cycle。3、94度 30秒,70度30秒,72度3min,5
2015年08月05日发布人:月牙牙
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][/size][/font],[size=4]我从文献上看到的最长的一次是30KB的一次PCR.自己扩的也不过才6000BP.
问题分析:1000BP很可能是非特意性的扩增.
建议:1,把你要扩的目的片段长度确定下来,以免扩出来了你还不
2011年09月21日发布人:蚊子
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[size=4][font=仿宋_GB2312][求助]急!cDNA降解?
我做的普通半定量pcr,条件已经做得很成熟了,条带扩的很清晰。不知道为什么最近1个月扩出来都有长长的象彗星尾似的拖带,目的条带很不清晰。双扩
2011年10月24日发布人:S6044
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[size=2][color=Black][font=黑体]
我做了三周的甲基化特异性PCR了,可用修饰完的DNA做模板,甲基化、非甲基化引物都扩不出来,而野生型引物确能扩出来,引物设计应该没问题,我现在高度怀疑是亚硫酸盐修饰有问题
2016年04月07日发布人:小荷尖尖
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[size=2][font=黑体]你有pcr扩不出来的情况吗?分析过原因是什么呢?[/font][/size],[size=2]找不到合适的退火温度,延伸时间,退火时间等等[/size],[size=2]
一般都是引物或条件问题
2014年08月26日发布人:莓菓333
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[size=2][font=黑体]我用天根的血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)提的昆虫肠道DNA,然后用细菌的引物进行PCR扩增,总是扩不出条带,之前试过排除各种因素的影响,都是没有条带,或者有一两个有特别弱的条带,然后
2015年02月14日发布人:shanzhapia696
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复评审进行中,组长很不好说话的样子,啥都问,下午的座谈会可咋整……,没事,该怎么回答就怎么回答,不知道就说不知道。,中午没给人家吃好吧,我们下周扩项评审,比较但是担心现场二氧化硫监测和大气采样部分的考核。,要求严了,评审组应当对其承担的
2016年04月29日发布人:小牛牛
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我做了三周的甲基化特异性PCR了,可用修饰完的DNA做模板,甲基化、非甲基化引物都扩不出来,而野生型引物确能扩出来,引物设计应该没问题,我现在高度怀疑是亚硫酸盐修饰有问题,不知用国产的亚硫酸氢钠和对苯二酚(北京化学试剂
2016年03月03日发布人:newway