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[size=2][color=Black][b]
Western blot 不常规而实用的做法1、简单而有效的抗体洗脱液配方:0.2mol/L NaOH;
使用方法:蒸馏水洗两遍,5min/次;洗脱液摇床洗1次,5min;最后蒸馏水
2013年04月13日发布人:applebook=213
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电泳结果中的分子量,差不多是)。现在我用肠激酶酶切后直接检测蛋白的活性,几乎没有,正是郁闷。现在找原因,想请问各位高手:
1. 蛋白失去活性,是因为什么?刚刚看到有人说还原剂会影响蛋白的二硫键,我在镍柱纯化时洗脱蛋白的洗脱液中含有2-
2014年02月15日发布人:seven7
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=2][color=Black]加样量过多或者加样孔泄漏[/color][/size],[size=2][color=Black]加样孔泄漏 请问是怎么回事啊?我怀疑是不是我样品的原因,我是亲和层析洗脱液从柱子上洗下来的抗原,就是免疫沉淀反应
2014年06月27日发布人:vtongli
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4 待上样完成后用binding buffer 再平衡
5 用50mM,100mM,150mM...1M咪唑梯度洗脱。
6 取洗脱峰出现位置及其附近的洗脱液做考染检测。
峰图: 洗脱峰出现的前后接了四管洗脱液做考染鉴定[/color
2013年10月31日发布人:#甜#
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柱,谷胱甘肽洗脱后,洗脱液SDS-PAGE 图谱如下
各泳道为:
1, 裂解液上清
2, 结合GST柱1次后流出液
3, 结合GST柱2次后流出液
4, PBS清洗流出液
5, 谷胱甘肽洗脱流出液
我的目的蛋白在
2013年05月10日发布人:079777chao
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mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 1.8 mM KH2PO4, 2 mM DTT);洗脱液选用的是50 mM Tris-HCl, 20 mM GSH, pH 8.0+2 mM DTT,但是在洗脱过程中没有出现目的蛋白的洗脱峰
2014年03月27日发布人:xevin
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:GST纯化,从左至右:marker、穿透、冲洗、洗脱液1、洗脱液2、洗脱液3(3个洗脱液成分一样)[/color][/size],[size=2][color=Black]第二张图:HIS纯化,从左至右:marker、穿透、冲洗、20、50
2013年10月06日发布人:bs4665
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[size=2][color=Black][font=黑体]表达的GST融合蛋白大小大约46KD左右,用GSH洗脱时,洗脱液含有较多的杂带,请问大家有什么办法能减少杂带的量。[/font][/color][/size],[size=2
2023年08月30日发布人:3N4G
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?是上凝胶柱么?
用柱子的话我先用缓冲液洗,一般洗至少一个半柱体积,再用含NaCl的缓冲液梯度洗脱,至少要让不同浓度的洗脱液都过了柱子才行,除非你知道大概的能够洗脱下来的盐浓度~,你这个问题问的呀,,,
关体积什么事呀?
纯水
2023年09月20日发布人:千里之外
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Tag来说,是最便宜的。对His Tag来说, 每克填料约10刀,配1 L 洗脱缓冲液约7元; 而GST Tag,每克填料9刀,配1 L 洗脱缓冲液约70元; 对于 StrepII, 每克填料约20刀,配1 L 洗脱缓冲液
2013年05月10日发布人:PCR