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=Black]可能有his渗漏表达,你加3AT看看[/color][/size],[size=2][color=Black]
应该是楼上所说的那样[/color][/size],[size=2][color=Black]
我刚准备做酵母
2015年05月14日发布人:laughing妹
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相关疾病:
感染
不知道有多少人成功用杆状病毒——昆虫细胞表达系统成功进行过蛋白表达?我最近表达一段病毒的非结构蛋白nsp-6,构建的重组Bacmid质粒经PCR鉴定正确,可是进行表达时
2017年04月13日发布人:ffaa
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对二者分别表达,同时想做一个共同表达,不知道能不能把两个蛋白连起来放到一个载体里实现共同表达?
谢谢[/color][/size],[size=2][color=Black]
好像风险很大,两个蛋白如果连在一起表达,表达出来的就是这
2013年11月15日发布人:skytree
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最近在做GST融合蛋白表达。先考虑的是可溶表达,跑SDS_PAGE,考马斯亮蓝染色后看不出来,做了WB,发现有目的蛋白表达。又跑了沉淀,目的条带很明显。也就是说,目的蛋白大量表达在包涵体里面
2013年06月03日发布人:摆渡客
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最近在做原核表达,包涵体。以前也做过,但经验不多。从园子里也学到不少。一点失败的教训以及纯化过程中的体会,贴出来与大家共享,同时希望得到同行们的指正
1. 首先介绍一下背景
2013年04月20日发布人:ukonptp
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因此我想设计载体对二者分别表达,同时想做一个共同表达,不知道能不能把两个蛋白连起来放到一个载体里实现共同表达?
谢谢[/font][/color][/size],[size=2][color=Black]
好像风险很大,两个蛋白如果
2016年08月18日发布人:bgf5
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宿主菌内后,也通过一系列检测确定了阳性克隆,所以开始表达.
3.用只含有空载体的受主菌和含有目的基因的受主菌摇菌,在达OD值0.55左右加入1mM IPTG诱导表达.
4.但问题是SDS-PAGE后,找不出两者有什么区别,?[/b
2013年04月24日发布人:nut6694
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大家好,我原来用pET28a载体在BL21(DE3)中表达,蛋白表达量很高,可是包涵体的形式,经过几次复性不成功后,决定更换载体和菌株来进行可溶性表达。结果原来表达
2014年01月15日发布人:mnstyle
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有一种说法我记得叫渗漏,就实在不加IPTG诱导时,由于培养基或者菌种本身可以产生类似乳糖的结构,诱导了表达
不过还是应该做好对照仔细判定一下是否是这种情况,表达量没变化但是蛋白是否有变化还是应该Western确证
2014年04月12日发布人:yueban-1147
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异源蛋白的表达是个很复杂的问题,有许许多多的影响因素,而且由于蛋白本身千差万别,很难有一个很完善或很标准的流程方法。
另外,表达的宿主也是多种多样,目前比较常用的包括E.coli,酵母
2014年09月30日发布人:bamboo16