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方法制备得到的已知拷贝数的含有目标片段的核苷酸序列。最常见的是插入有目标序列的质粒,因为质粒是环状DNA有较强的稳定性,而且分子量比较大定量的时候比较准确。也有用线状的PCR产物作为标准品的,通常要比扩增的目标片段要大一些,这也是为了获得分子量比较大的片段,提高拷贝数的准确性。标准品的拷贝数是通
2011年08月24日发布人:白鸟之翼
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用限制性内切酶酶切样品DNA,然后用DNA连接酶连接成一个环状分子,通过反向PCR扩增引物的上游片段和下游片段。
我对这句话:“这时选择的引物虽然与核心DNA两末端序列互补,但引物3’端是相互反向的。” 百思不得其解!
请大家多多指教
2011年08月20日发布人:如影随形
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步移。这时选择的引物虽然与核心DNA两末端序列互补,但引物3’端是相互反向的。
反向PCR的操作流程:扩增前先用限制性内切酶酶切样品DNA,然后用DNA连接酶连接成一个环状分子,通过反向PCR扩增引物的上游片段和下游片段。
我对这句
2016年01月07日发布人:ilovegaga
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[size=2][font=Impact][color=Black]目的:1.DNA甲基化处理,2.甲基化特异PCR
已试方法:
利用chemicon 公司的CpGenome™ DNA Modification Kit 进行甲基化
2016年04月08日发布人:阿福
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[size=2]
本人要做抗凝血DNA的提取(EDTA抗凝),但是我想问一下可以库存后再做么?可以在-20度放多久?需要特殊处理么?有无实验步骤发来?谢谢![/size],[size=2]
可以库存的。最好在-80度。
一般不需要
2015年08月31日发布人:memory
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[size=4][color=Black]提取组织样品中的病毒DNA [转载]
今天一天都没吃肉,主要因为上午做了4个组织样品的核酸提取前处理.
差点晕死了,样品是在-20度冰箱里保存的前年的可疑组织病料,刚拿出来还好,一会儿
2011年09月24日发布人:mod=8048
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[size=4][color=Purple][font=楷体_GB2312][b]求助“关于石蜡组织DNA的提取” [转载]
我现在正做着从石蜡包埋组织中提取DNA的实验,但是我用粗提的DNA做PCR一直没有成功,本想是不是
2011年09月20日发布人:紫圃
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都知道DNA甲基化能抑制基因表达,但是为什么?,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。
比如:甲基化会促使异染色质化,DNA构象改变(如Z型-B型之间的
2013年12月20日发布人:ssonglikihi
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[size=4][color=DarkRed][font=楷体_GB2312]DNA用什么方法定量最准确 ?[转载]
我从1ml人全血抽提的DNA用紫外分光光度计定量,发现每次读数都不一样,因为抽提出来的DNA大概只有3-5微克
2011年09月21日发布人:莓菓333
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[color=RoyalBlue][size=6][font=楷体_GB2312][b]RNA,CDNA,DNA的保存方式和时间?? [转自 丁香园论坛]
关于RNA,CDNA,DNA的保存方法和时间的帖子为数不少,但好像
2011年08月23日发布人:幸福无罪