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各位师兄师姐:本人想提取大量细胞膜蛋白做受体纯化,已设计把RAW264.7细胞打入小鼠腹腔,收集腹水细胞及腹腔肿瘤,但收集到的细胞如何保存,文献上说要保存到裂解液中,然后提膜蛋白,不知该如何
2014年02月05日发布人:junhun
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请教大家曾使用过的比较成熟的细胞膜蛋白提取方法及其中的液体配方,谢谢![/font][/color][/size],[size=2][color=Black]
用RIPA强
2017年08月16日发布人:minran_1980
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][/size],[size=2][color=Black]还是买个试剂盒省事。[/color][/size],[size=2][color=Black][font=Impact]
请教上述提取膜蛋白的配方适合细胞质膜还是包括质膜和细胞器膜蛋白
2013年06月04日发布人:nikun230
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应该看你的实验目的。
WB是检测某一蛋白的总表达量。但对于细胞膜蛋白,WB不能反映原位表达量,而流式则能。[/color][/size],[size=2][color=Black]
以上内容在此学习了。各位群友,在检测某基因蛋白表达情况时,除免疫组化外,近几
2012年03月22日发布人:newway
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请问有能同时提细胞膜蛋白和细胞浆蛋白的方法吗?急需!!!!不胜感激!![/color][/size],[quote]原帖由 [i]xiaoxiaoniao[/i] 于 2013-12-7 17
2013年12月07日发布人:xiaoxiaoniao
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方法多用于检测细胞膜蛋白,虽然也可通过Triton-X100给细胞打孔的方法来检测胞内蛋白,但对于分泌蛋白却是无能为力的;
2、Western测蛋白含量对抗体的量需要很少,一般1:1000左右,而流式对抗体的需要量很大,一般1:50(很浪费
2012年05月29日发布人:eric930
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我重组表达的膜蛋白在体内是高表达于红细胞内。目前我已经成功表达该膜蛋白并且免疫小鼠生产了多抗。现在我想用这个多抗进行CO-IP,寻找与之相互作用的蛋白。在园子里查询相关资料
2013年10月08日发布人:finger
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作为内参似乎不妥,因为理论上来讲β-actin在膜上是不表达的。WB能做出β-actin来是因为膜蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了。然而,如果我们试验目的是用药物处理细胞,比较处理前后某种膜蛋白的表达情况,此时用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白后再用β-actin做内参似乎就不妥了,因为你根本不知道药物处理前后混杂了多少的胞质蛋白进来。如果没有
2013年11月13日发布人:luoliqiong
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原因,该如何处理细胞啊?多谢[/b][/color][/size],[size=2][color=Black]
我们实验室全部都用玻璃培养瓶的,因为塑料与细胞的粘连是非常严重的,推测可能是细胞膜蛋白与聚苯乙烯类的吸附作用较强[/color
2012年07月20日发布人:mickeylin
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请问各位网友,我提的细胞膜蛋白,已经冻干了,打算做WESTERN,用什么来溶解才能保证蛋白不降解呀?[/color][/size],[size=2][color=Black]
很简单,用1
2014年02月05日发布人:idoww