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][/size][/color],[color=Black][size=4][font=楷体_GB2312][b]上篇
PCR的基本理论与技术
第一章 聚合酶链式反应
分子克隆(molecular cloning)、DNA测序(DNA
2011年08月30日发布人:荷塘青蛙!
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[/size],[size=2]我想请教一下聚合酶延伸效率的问题。一般的聚合酶的延伸效率是多少?在做pcr的时候,为什么20s就可以扩增出2K的片段?很迷惑。[/size],[size=2]
如何pcr新基因
2014年09月26日发布人:@STAR@
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聚合酶.
如果想扩增片段忠实于母体序列,最好还是用pyrobest DNA polymerase 和primeSTAR HS DNA polymerase.
不要总听业务员的推荐.[/size],[size=2]
TAKALA的LA
2015年06月03日发布人:txwuyan
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furiosus)DNA聚合酶,具有完整的3'外切酶校读活性(3'-editing-exonuclease),可以将每个循环中碱基的错配率由10*-4降到10*-3,从而提高PCR产物的准确性。但它在扩增1.5-2.0kb片段时,效率比Klentaq l
2015年02月15日发布人:NBA
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[font=宋体][size=4][color=DarkRed]关于长片断PCR [转载]
请问大家尝试过的最长片断的PCR有多长啊?
我想做3000bp左右的PCR,用高保真的DNA聚合酶,可是几次扩增出来的只有1000bp
2011年09月21日发布人:蚊子
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“Premier Primer 5”软件,而引物的评价分析则可采用“Oligo 6”软件。
关键词:PCR;引物设计
中图分类号:Q524 文献标识码: 文章编号:
1
自从1985 年Karny Mullis 发明了聚合酶
2011年08月20日发布人:微笑的海豚
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[/color][/size],[size=4]不能重新设计就试试降低一下引物浓度,调整一下体系如优化镁离子浓度或改变模板量。除此之外,形成引物二聚物的原因很多,如聚合酶是否活化,还有program,退火温度太高,时间太短,延伸时间太短都可
2011年09月20日发布人:了了
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镁离子浓度或改变模板量。除此之外,形成引物二聚物的原因很多,如聚合酶是否活化,还有program,退火温度太高,时间太短,延伸时间太短都可能是原因。[/size],[size=2]我认为应该在PCR程序中,把循环中的退火温度提高才对,避免二聚体
2015年06月03日发布人:jude
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2+浓度偏高
5.循环次数过多
建议从以下几方面优化:
1.减少DNA聚合酶用量
2.适当提高退火温度
3.适当降低dNTP和镁离子的浓度
4.减少循环次数[/size],[size=2]
引物不好,如果
2015年09月04日发布人:西子
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扩增产物的分析
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。 它具有特异、敏感、产率高、 快速、 简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究
2011年08月22日发布人:阿拉蕾