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柱,谷胱甘肽洗脱后,洗脱液SDS-PAGE 图谱如下
各泳道为:
1, 裂解液上清
2, 结合GST柱1次后流出液
3, 结合GST柱2次后流出液
4, PBS清洗流出液
5, 谷胱甘肽洗脱流出液
我的目的蛋白在
2013年05月10日发布人:079777chao
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GST pull-down实验是一个行之有效的验证酵母双杂交系统的体外试验技术,近年来越来越受到广大学者的青睐。其基本原理是将靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的蛋白
2013年06月08日发布人:ukonptp
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表达到GST部分就终止,所以26KD左右的杂带是很常见的,那可以选择用不同浓度的还原谷胱甘肽去做阶段洗脱,如果还是分不开,那也许就得选择离子交换或者凝胶过滤等别的分离手段。提高平衡缓冲液中的盐浓度可以降低因为离子作用带来的非特异吸附。在平衡缓冲液中添加0.5%吐温或Triton可
2023年08月30日发布人:3N4G
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本人利用PGEX3X的载体表达GST融合蛋白,蛋白大小据推测应在80-90KD之间.表达蛋白通过谷胱甘肽柱子纯化,发现虽然在推测位置有一条带,但纯化出的大量蛋白在60KD左右
2014年06月09日发布人:wzqzy
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PB+1mM EDTA+0.1M NaCl+0.2mM GSSG(氧化型谷胱甘肽)+0.5 mM GSH(还原型谷胱甘肽),pH8.0,可是结果仍然不好,请高手给与指点。[/color][/size],[size=2][color
2014年03月18日发布人:莓菓333
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10倍柱床体积(指50%GS4B柱体积)预冷的1*PBS清洗柱子,之后离心700rpm/min左右,4度,5min,弃上清。
4.重复3,共清洗3遍。
5.加1倍柱床体积还原型谷胱甘肽置换柱子上结合的蛋白,轻柔混匀10min,室温,离心
2014年04月12日发布人:join
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洗拖下来的1、2、3
不知原因?表达问题?纯化问题?[/size],[size=2][color=Black]
不明白楼主的意思
GST纯化,一步直接用10mM的谷胱甘肽就可以洗脱下来了啊。怎么来了一个洗脱一
2014年03月16日发布人:dhpbj
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),其他条件和上面一样,也进行了WB确认和酶活检测,然后用Glutatione Sepharose 4B进行纯化回收目的蛋白(与蛋白结合过夜),对分别用PBS和还原型谷胱甘肽(10mM)洗脱buf
2013年05月10日发布人:土豆potato
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医生开了还原型谷胱甘肽片(重庆药友,商品名:阿拓莫兰片),作为保肝药。太贵了,请问服用同样剂量、成分的保健品能起到同样或者近似的效果吗?不知道这种药除了主要成分以外,还有没有其他因素影响吸收利用什么的。能吃这种保健品替代吗?
阿拓莫
2014年02月11日发布人:大学习
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条件吧![/color][/size],[size=2][color=Black]
谢谢楼上的
我想请问是除了改变盐浓度外,是不是也可以改变还原型谷胱甘肽的浓度?[/color][/size],[size=2][color=Black
2014年06月21日发布人:红茶可乐